نام پژوهشگر: سنبل ناظری

مطالعه رویان زایی بدنی و تغییرات الگوی پروتئینی و ترکیبات فنلی در طول نمو رویان های بدنی در 3 گونه از جنس اسپرس
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم پایه 1388
  سهیلا شعبانیان   رویا کرمیان

چکیده: جنس onobrychis millerبا بیش از 70 گونه در ایران پس از جنس گون بزرگ ترین جنس از تیره fabaceae است. گیاهان این جنس به دلیل ارزش غذایی بالا، اغلب به عنوان علوفه مورد استفاده قرار می گیرند. بخش های onobrychis و hilobrychisاز بخش های مهم این جنس در ایران می باشند. در این مطالعه فرآیند اندام زایی و رویان زایی بدنی با استفاده از قطعات جداکشت مختلف حاصل از دانه رست (محور زیرلپه، محور روی لپه و لپه) در گونه های o. viciifolia، o. sosnovskyi، o. aucheri و o. altissima مورد مطالعه قرار گرفت. رویان های بدنی و نوشاخه ها در محیط کشت ms واجد غلظت های مختلفی از هورمون های naa، bap و 2,4-d القاء شدند. رویان های بدنی کروی با انتقال به محیط کشت ms فاقد هورمون، مراحل بلوغ را سپری کرده و جوانه زدند. مطالعات بافت شناسی مراحل مختلف رویان زایی بدنی را تایید نمود. رویان های جوانه زده و نوشاخه ها با انتقال به محیط کشت ms واجد 5/0- 1 میلی گرم در لیتر naa و 1 میلی گرم در لیتر bap تکثیر و سپس با انتقال به محیط کشت ms واجد 1 میلی گرم در لیتر naa یا 3 میلی گرم در لیتر iba ریشه دار شدند. به منظور درک فرآیند بلوغ رویان های بدنی، تغییرات محتوای پروتئین کل و نیز الگوی پروتئینی طی رویان زایی بدنی به روش های اسپکتروفتومتری و page-sds مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که سنتز پروتئین ها در طی بلوغ رویان ها افزایش یافته و پروتئین های 14، 16، 24، 44 و 50 کیلو دالتونی در رویان های قلبی شکل و پس از آن قابل تشخیص می باشند. سنتز و راسب شدن این پروتئین های ذخیره ای و lea در طول رویان زایی بدنی و زیگوتی، اغلب با بیان ژن القاء شده توسط تنش خشکی یا aba تنظیم می شود. فعالیت آنزیم های پلی فنل اکسیداز و پراکسیداز در طی رویان زایی بدنی به روش اسپکتروفتومتری مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج حاصل حاکی از افزایش فعالیت این آنزیم ها در طی پیشرفت مراحل بلوغ رویانی است. همچنین محتوای ترکیبات فنلی کل در مراحل مختلف رویان زایی بدنی به روش اسپکتروفتومتری مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که با افزایش میزان اکسین در هنگام القای رویان زایی بدنی، میزان ترکیبات فنلی افزایش یافته و سپس با پیشرفت مراحل رویانی و بلوغ رویان ها کاهش می یابد.

بررسی اثرات ضد باکتری، آنتی اکسیدانت و سمیت عصاره توده های بومی گیاه خارشترalhagi persarum استان های آذربایجان شرقی،اردبیل و همدان
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1388
  علی رمضانی زاده باغمیشه   سنبل ناظری

چکیده : ابزارهای بیوتکنولوژی و تکنیک های آن راهگشای تحقیقات جدید برای درک چگونگی عملکرد بدن های سالم می باشد. شناخت پایه ملکولی سلامت و بیماری منجر به کشف روش های جدید برای درمان و جلوگیری از بیماری می شود. استفاده از گیاهان داروئی از زمان های قدیم تا به امروز توسط عامه مردم به طور گسترده رایج بوده است؛ بنابراین مطالعه اثرات سیتوتوکسیک ، ژنوتوکسیک(ناهنجاری های کروموزومی) و ضدمیکروبی آنها امری ضروری می باشد. گیاه خارشتر یکی از گیاهانی است که به طور معمول به عنوان گیاه داروئی مصرف می شود. این گیاه مدر، خلط آور و ملین می باشد و در رفع ناراحتی های کلیه و نیز درمان روماتیسم و بواسیر مورد استفاده قرار می گیرد. در این تحقیق جهت ارزیابی میزان سمیت غلظت های مختلف عصاره دم کرده توده های بومی گیاه خارشتر استان های آذربایجان شرقی، اردبیل و همدان از مدل گیاهی پیاز استفاده گردید. نتایج این تست نشان داد، عصاره دم کرده این سه گیاه در غلظت مورد استفاده در طب سنتی(20 میلی گرم در میلی لیتر)، بر روی سلول های ریشه پیاز اثرات سمی داشته و باعث بروز برخی ناهنجاری های کروموزومی می شود. در بررسی خواص ضدتوموری و ضدسرطانی این سه گیاه، اثر برخی فرکشن های عصاره این گیاهان بر روی بقاء دو لاین از سلول های سرطانی(سرطان سینه mcf-7 و سرطان روده ht-29) با استفاده از دو آزمون ldh و تریپان بلو مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاکی از این بود که بیشترین اثر ضد سرطانی بر روی سلول های mcf-7 و ht-29 به ترتیب به میزان 5/85 و 69 درصد مربوط به غلظت 400 میکروگرم در میلی لیتر فرکشن اتیل استاتی عصاره گیاه خارشتر بومی استان اردبیل می باشد. در ارزیابی خواص ضدمیکروبی، اثرات ضدباکتریایی غلظت های مختلف از سه نوع عصاره متانولی، هیدروالکلی و آبی این سه گیاه بر روی 5 نوع باکتری بیماری زا بررسی گردید. بررسی ها نشان داد که غلظت های بالا(200 و400 میلی گرم در میلی لیتر) از عصاره های هیدروالکلی و آبی این سه گیاه دارای اثرات ضدباکتریایی بر روی باکتری های کلبسیلا پنومونیه، شیگلا فلکسنری و باسیلوس سوبتیلیس می باشند، اما بر روی باکتری های اشرشیاکولی و استافیلوکوکوس اورئوس اثر ضدباکتریایی خاصی در مورد هیچ کدام از انواع عصاره های سه گیاه مذکور مشاهده نشد. درارزیابی خواص آنتی اکسیدانی این سه گیاه، میزان فنول کل برای گیاهان خارشتر بومی استان های آذربایجان شرقی، اردبیل و همدان به ترتیب 748/7، 305/8 و 978/6 میلی گرم اسید گالیک در گرم ماده خشک اندازه گیری شد و میزان کل فلاونوئید نیز به ترتیب 11/4، 013/4 و 955/3 میلی گرم کوئرستین در گرم ماده خشک تعیین گردید. درتست dpph نیز ic50 ارزیابی شده برای سه گیاه مذکور به ترتیب 137/0، 128/0 و 1353/0 میلی گرم در میلی لیتر بود. برای القاء ریشه های مویین ، ابتدا ریزنمونه ها توسط باکتری فعال شده آلوده گردیده و سپس کشت توأم باکتری آکروباکتریوم ریزوژنز استرین a4 با ریزنمونه های برگ و ساقه این گیاه انجام شد. پس از ایجادکالوس، ریشه های مویین با درصد بیشتر از ریزنمونه های برگی تولید شدند. جهت تأیید تراریختی، آنالیزpcr با استفاده ازآغازگر اختصاصی ژن rol b انجام پذیرفت. نتیجه آنالیز pcr، وجود باندهای تشخیصی مربوط به تکثیر اختصاصی ژن rol b را با اندازه 780 جفت بازی نشان داد و بدین ترتیب تراریختی ریشه های مویین تأیید شد. کلمات کلیدی: سیتوتوکسیسیتی، ژنوتوکسیسیتی، ضدباکتریایی، گیاه خارشتر، ناهنجاری های کروموزومی، ضدسرطان، آنتی اکسیدانی، آگروباکتریوم ریزوژنز، ریشه های مویین.

بررسی مقایسه ای ترکیبات فنلی و فلاونوئیدهای کل و فعالیت آنتی اکسیدانی آنها در گیاهان خودرو و باززایی شده در 3 گونه از جنس اسپرس
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم پایه 1388
  فاطمه وحدت لاسمی   رویا کرمیان

جنس onobrychis millerبا بیش از 70 گونه در ایران پس از جنس گون بزرگترین جنس از تیره fabaceae است. گیاهان این جنس بدلیل ارزش غذایی بالا، اغلب به عنوان علوفه مورد استفاده قرار می گیرند. بخش onobrychis یکی از بخش های مهم این جنس در ایران می-باشد. در این مطالعه فرایند اندام زایی و رویان زایی بدنی با استفاده از قطعات جداکشت مختلف حاصل از دانه رست (محور زیرلپه، محور روی لپه و لپه) در گونه های o. verae،o. megataphros ، o. altissima و o. shahpurensis مورد مطالعه قرار گرفت. رویان های بدنی و نوشاخه ها در محیط کشت ms واجد غلظت های مختلفی ازهورمون های naa، bap و 2,4- d القاء شدند. رویان های بدنی کروی با انتقال به محیط کشت ms فاقد هورمون، مراحل بلوغ را سپری کرده و جوانه زدند. مطالعات بافت شناسی مراحل مختلف رویان زایی بدنی را تائید نمود. رویان های جوانه زده و نوشاخه ها با انتقال به محیط کشت ms واجد 1 -5/0 میلی گرم در لیتر naa و 1 میلی-گرم در لیتر bap تکثیر و با انتقال به محیط کشت ms واجد 1 میلی گرم در لیتر naa یا 3 میلی گرم در لیتر iba ریشه دار شدند. به منظور درک فرایند بلوغ رویان های بدنی، تغییرات محتوای پروتئین کل و نیز الگوی پروتئینی طی رویان زایی بدنی به روش اسپکتروفتومتری و page -sds مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که سنتز پروتئین در طی بلوغ رویان ها افزایش یافته و پروتئین های 11، 14، 24، 40 و 44 کیلو دالتونی در رویان های قلبی شکل و پس از آن قابل تشخیص می باشند. سنتز و راسب شدن این پروتئین های ذخیره ای و lea در طول رویان زایی بدنی و زیگوتی، اغلب با بیان ژن القاء شده توسط تنش خشکی یا aba تنظیم می شود. فعالیت آنزیم پلی فنل اکسیداز در طی رویان زایی بدنی به روش اسپکتروفتومتری مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج حاکی از افزایش فعالیت این آنزیم در طی پیشرفت مراحل بلوغ رویانی است. همچنین محتوای فنل کل در مراحل مختلف رویان زایی بدنی به روش اسپکتروفتومتری مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که با افزایش میزان اکسین در هنگام القاء رویان زایی بدنی، میزان ترکیبات فنلی افزایش یافته و سپس با پیشرفت مراحل رویانی و بلوغ رویان ها کاهش می یابد. محتوای ترکیبات فلاونوئیدی در مراحل مختلف رویان زایی بدنی به روش اسپکتروفتومتری مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان داد که با القاء رویان زایی بدنی محتوای فلاونوئید کل افزایش می یابد. افزایش مقدار فلاونوئید در طول مراحل رویان زایی بدنی می تواند با پاسخ قطعات جداکشت در برابر تنش های موجود در محیط کشت که به بیان ژن های بلوغ و نمو رویان ها کمک می کند، ارتباط داشته باشد. فعالیت مهارکنندگی رادیکال های اکسیژن در کالوس و گیاهچه های باززایی شده به روش اسپکتروفتومتری مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج نشان می دهد که فعالیت مهار کنندگی رادیکال-های اکسیژن در طول مراحل رویان زایی بدنی افزایش می یابد.

انتقال ژن بتا-گلوکورونیداز به گیاه پونه آبی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1389
  بهنوش حاجیان   سنبل ناظری

پونه آبی گیاه دارویی چندساله متعلق به خانواده لابیاته می باشد. گسترش این گیاه بیشتر در نواحی معتدل و نیمه معتدل دنیا است. این گیاه به دلیل استفاده در زمینه های مختلف دارویی، بهداشتی و غذایی حائز اهمیت است. تراریختی بواسطه آگروباکتریوم باعث تولید گیاهان تراریخت بی شمار با ویژگی های برجسته شده است. گیاه تراریخت حاوی ژن گزارشگر فقط در نعناع به دست آمده است . بنابراین شایان توجه است که این تراریختی در مورد گونه های دیگر این جنس مثل پونه آبی هم انجام شود. برقراری یک سیستم باززایی قابل اعتماد در برنامه های انتقال ژن گیاهی ضروری است. در این تحقیق، باززایی مستقیم گیاه پونه آبی از دیسک های برگی در شرایط آزمایشگاهی صورت گرفته است. بهترین نتایج زمانی به دست آمد که از محیط ms همراه با چهار میلی گرم در لیتر هورمون bap استفاده شد. گیاهان تراریخت در اثر هم کشتی دیسک های برگی با آگروباکتریوم تومفسینس سویه gv3850 حامل وکتور pb121 که در برگیرنده ژن بتا-گلوکورونیداز باکتری ای. کولی به عنوان ژن گزارشگر و ژن مقاومت به کانامایسین به عنوان نشانگر انتخابی بود، به دست آمد. شواهد حضور و بیان ژن های انتقال یافته در گیاهان تراریخت توسط سنجش هیستوشیمیایی gus و واکنش pcr بررسی شد. بازدهی نهایی ترانسفورماسیون در حدود 12% به دست آمد. غربالگری مجازی ترکیبات دارویی پونه آبی با استفاده از روش داکینگ مولکولی انجام شد و ترکیباتی که بیشترین پتانسیل دارویی را داشتند مشخص شد.

جداسازی باکتری های نمک دوست متحمل به نیکل از دریاچه آران و بیدگل وشناسایی نسبی آن با استفاده از ژنs rdna 16 وتست های بیوشیمیایی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1389
  فرناز خدابخش   سنبل ناظری

فلزات سنگین برای انسان، حیوانات و حتی گیاهان سمی هستند. بطور مثال آالودگی به نیکل در انسان می تواند به ازدیاد حساسیت تماسی و سرطانزایی منجر گردد. جهت زدودن فلزات سنگین از محیط زیست، روش های فیزیکو - شیمیایی به همراه روشهای بیولوژیک استفاده می-گردد. برخی باکتری ها به این فلزات مقاوم بوده و در حضور آنها قادر به رشد هستند. این باکتری ها قادر به حذف فلزات سنگین از طریق تجزیه زیستی هستند. در این پژوهش، باکتری های نمک دوست نسبی از دریاچه شور آران و بیدگل جداسازی شده و مقاومت آنها در ابتدا به نیکل و سپس به سرب، کادمیوم، کبالت، نقره، مس و روی بررسی شد. کارایی پاکسازی و توان جذب باکتری های های مقاوم به نیکل مورد بررسی قرار گرفت. بررسی های مرفولوژیکی، بیوشیمیایی و نیز فیلوژنتیکی بر روی این باکتری ها صورت گرفت. چهل و شش ایزوله باکتری، از نمونه های انتقال یافته به محیط کشت حاوی 10 درصد نمک جداسازی شد. در آزمایش مقاومت به فلز نیکل، چهار باکتری مقاوم به نیکل مشخص گردید. این چهار باکتری برای آزمایشات بعدی انتخاب شدند. ایزوله های فوق همگی کوکوباسیل، گرم منفی، فاقد اندوسپور و بی هوازی اختیاری بودند. همگی توانایی استفاد از قند ترهالوز را به عنوان منبع کربوهیدرات داشتند و همگی کاتالاز، اکسیداز، اوره آز مثبت بودند. ایزوله ها مقاوم به پنی سیلین و به اریترومایسین حساس و همگی به سرب مقاوم و به نقره حساس بودند. آزمایش نحوه جذب نیکل نشان داد که باکتری ها به روش غیر فعال نیکل را از محیط کشت جذب می کنند.به این معنی که نه تنها سلول های زنده، بلکه سلول های مرده این باکتری ها نیز توانایی جذب نیکل را در محیط دارند. بررسی بر اساس تعیین توالی ژن کد کننده s rrna16 نشان داد که دو ایزوله از جنس salinivibrio بودند و یکی از ایزوله ها شباهت 99 درصد با costicola salinivibrio داشت.

بررسی فنول کل در گیاه چای کوهی (stachys lavandulifolia vahi. ) از طریق کشت اندام، سوسپانسیون و کالوس
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1389
  بیلال مهربانی   سنبل ناظری

چکیده محصولات طبیعی گیاهی در کشور های توسعه یافته هنوز بخش مهمی از طب سنتی را تشکیل می دهد. در طی سال های اخیر مطالعات داروشناسی نشان داده ،که عصاره وترکیبات حاصل از گیاهان متعلق به جنس stachys خواص ضد باکتری ضداکسیدان، ضد نفریت، ضد هپاتیت، اثرات آرامش بخشی و ضد فشار خون پائین دارند. stachys lavandulifulia vahi با نام محلی چای کوهی، در مناطق مختلف ایران پراکندگی دارد. جوشانده بخش های هوائی این گیاه در طب سنتی ایران در درمان درد و التهاب مورد استفاده قرار می گیرد.حضور ترکیبات مختلف پلی فنولی در این گیاه گزارش شده است. پلی فنول ها ویا ترکیبات فنولی دارای فعالیت آنتی اکسیدانی هستند. گیاهان در شرایط درون شیشه قادر به تولید متابولیت های ثانویه ارزشمند از نظر داروئی مانند ترکیبات فنولی هستند. به همین منظور، اثرات انواع کشت ها (اندام ، کالوس و سوسپانسیون) در شرایط درون شیشه بر فنول وفلاونوئید کل مورد بررسی قرار گرفتند. اثر هورمون های ba و naa بر رشد و میزان فنول و فلاونوئید کل در کشت شاخه مورد بررسی قرار گرفتند. تفاوت معنی داری در رشد و تکثیر ریز نمونه و میزان فنول وفلاونوئید کل بین محیط دارای ba (بدون naa) و محیط ba+naa در کشت شاخه مشاهده شد. اثر غلظت های مختلف-d 2،4 بر میزان القاء کالوس در ریز نمونه های برگ بررسی شد.اختلاف معنی داری در رشد کالوس در هنگام استفاده از هورمون در غلظت 2 و 1 میلی گرم در لیتر در مقایسه با تیمار شاهد مشاهده شد. اثر دو محرک (متیل جاسمونات و سالیسیلیک اسید) و زمان اثر محرک بر میزان تولید فنول در کالوس مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که تفاوت معنی دار در میزان فنول کل بین تیمار دارای محرک وشاهد وجود دارد. بیشترین میزان فنول در تیمار دارای 10 میکرومولار متیل جاسمونات ارزیابی شد. اثر زمان بر تولید فنول کل در این آزمایش در سطح 1 درصد معنی داربود، در حالی که تفاوت معنی داری بین اثرات متقابل آنها با هم مشاهده نشد. در کشت سوسپانسیون، دو محرک متیل جاسمونات و سالیسیلیک اسید جهت افزایش میزان فنول اضافه شد. هر دو محرک سبب افزایش فنول نسبت به شاهد شدند.

تولید صمغ کتیرای گیاه گون زرد (astragalus verus olivier ( در محیط کشت تعلیقی تحت غلظت های مختلف هورمونی naa و ba
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1390
  حمید امیری باغبادرانی   سنبل ناظری

چکیده کشور ایران خاستگاه اصلی و یکی از مراکز مهم تنوع گونه های گون است.گیاه گون زرد با نام علمی astragalus verus orlivie یکی از گونه های مولد کتیرا است که در سراسر رشته کوه های البرز و زاگرس پراکنده است.کتیرای این گیاه دارای کاربرد های فراوانی درصنایع غذایی، دارویی و صنعتی است که این گیاه را در زمره گیاهان صنعتی قرار می دهد. صمغ کتیرا از جمله ترکیبات ثانویه است که در شرایط درون شیشه ای در کشت تعلیق نیز تولید می شود. در این تحقیق اثر انواع محیط های مختلف هورمونی ba و 2,4-d در شرایط درون شیشه ای بر کالوس زایی و تولید صمغ کتیرا مورد بررسی قرار گرفت. هم چنین اثر اسید سولفوریک،آب گرم و اسید جیبرلیک بر جوانه زنی بذور این گیاه مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که تفاوت معنی دار (در سطح یک درصد) بر میزان جوانه زنی بین بذور تیمار شده با تیمار شاهد داشت، بیشترین میزان جوانه زنی در تیمارهای با اسید سولفوریک غلیظ ارزیابی شد. اختلاف معنی داری در میزان القای کالوس در هنگام استفاده از هورمون ba در غلظت های مختلف در مقایسه باشاهد(فاقد هورمون) مشاهده شد. در کشت سوسپانسیون اثر غلظت های مختلف هورمونی دراین آزمایش در سطح 1 درصد معنی داربود، روند تولید صمغ در کشت تعلیقی به طور کلی با افزایش غلظت اکسین افزایش می یابد

رویان زایی سوماتیکی، باززایی گیاه و خواص ضد میکروبی و آنتی اکسیدانی گیاه وشا (dorema ammoniacum d.)
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1390
  خدیجه قاسمیان   سنبل ناظری

گیاه وشا از گیاهان دارویی بومی ایران است که به دلیل برداشت های بی رویه و تخریب رویشگاه های طبیعی آن در کشور، این گیاه در معرض انقراض قرار دارد. به دلیل ذکر شده و اینکه رویان زایی سوماتیکی یکی از روش های مفید برای تکثیر گیاهان به شمار می رود، در تحقیق حاضر رویان زایی سوماتیکی این گیاه برای اولین بار مورد بررسی قرار گرفت. اثر ریز نمونه های رویان بذری، ریشه، هیپوکوتیل، کوتیلدون و جوانه جانبی و همچنین ثاثیر هورمون های naa و ba بر القای کالوس رویان زا از این ریز نمونه ها مورد بررسی قرار گرفت. رویان بذری تنها ریز نمونه ای بود که از آن کالوس رویان زا تولید شد. محیط ms حاوی 1 میلی گرم بر لیتر naa و 5/0 میلی گرم بر لیتر ba، بهترین محیط برای تشکیل کالوس رویان زا و تولید حد اکثر تعداد رویان سوماتیکی بود. محیط msبدون هورمون برای القای رویان زایی در کالوس های بدون رویان بی اثر بود. اثر هورمون های naa و -d4و2 و ba، بر تکثیر بیشتر کالوس های رویان زا و رویان زایی بررسی شد. بیشترین گسترش کالوس در محیط ms حاوی 1 میلی گرم بر لیتر -d4و2 و 5/0 میلی گرم بر لیتر ba، بیشترین رویان زایی در محیط ms حاوی 2 میلی گرم بر لیتر -d4و2 و 5/0 میلی گرم بر لیتر ba مشاهده شد. بعد از انتقال رویان ها به محیط ms2/1 بدون تنظیم کننده رشد، تقریبا 90 تا 95 درصد رویان ها به صورت گیاهچه تکامل یافتند و گیاهچه های باززا شده به گلدان منتقل گردیدند. رویان زایی سوماتیکی ثانویه در محیط های اکسین دار مشاهده شد. رویان های سوماتیکی به دو شکل تکثیر یافتند، 1) ازدیاد رویان ها از طریق رویان زایی اولیه و 2) تکثیر رویان های سوماتیک ثانویه، که تکرار پذیر بود. بررسی های بافت شناسی تائیدی بر رویان زایی سوماتیکی بود و مشابهت مراحل رویان زایی سوماتیکی در گیاه وشا را با مراحل رویان زایی زیگوتی، نشان داد. در بررسی الگوی پروتئینی در sds-page، الگوی مشابهی در رویان سوماتیکی و رویان زیگوتی مشاهده گردید. از زمان های قدیم مصرف گیاهان دارویی به طور گسترده رایج بوده است. در این تحقیق فعالیت ضد میکروبی و آنتی اکسیدانی عصاره های گیاه وشا از طریق سنجش میزان فنول و فلاونوئید کل و خاصیت ضد رادیکالی بررسی شدند. اثر غلظت های مختلف دو عصاره هیدروالکلی این گیاه بر روی 10 نوع باکتری بیماری زا بررسی گردید، بررسی ها نشان داد که عصاره ها در اکثر موارد مانع از رشد باکتری شدند و تنها باکتری سودوموناس آئروجینوزا نسبت به عصاره های هیدروالکلی گیاه مقاومت نشان داد. در هر دو عصاره، بیشترین هاله ممانعت از رشد بر روی باکتری سالمونلا تیفی مشاهده گردید. محتوای فنول و فلاونوئید کل عصاره به ترتیب 032/6 میلی گرم اسید گالیک در گرم وزن خشک و 812/3 میلی گرم کوئرستین در گرم وزن خشک تعیین گردید. درتست مهار dpph، ic50 عصاره گیاه ارزیابی شد و این میزان برابر 113/0 میلی گرم بر میلی لیتر و کمتر از ic50 اسید آسکوربیک بود.

بررسی مولکولی حضور برخی ژن های درگیر در بیوسنتز تاکسول در قارچ های اندوفیت سرخدار و بررسی تولید تاکسول در آنها
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1391
  مقصود سیفی   جلال سلطانی

تاکسول یک داروی ضدسرطان با منشاء گیاهی است که بطور گسترده برای درمان انواع مختلف سرطان استفاده می شود. روش های استخراج سنتی تاکسول از گونه های سرخدار بسیار سخت و هزینه بر است. بنابراین بررسی منابع جایگزین مناسب برای این داروی باارزش ضروری بنظر می رسد. تحقیقات نشان داده است که علاوه بر گونه های سرخدار، تاکسول توسط انواعی از قارچ های اندوفیت این گیاه نیز سنتز می شود. مسیر بیوسنتزی این ماده مشتمل بر حداقل بیست آنزیم است. مسیر بیوسنتزی تاکسول در سرخدار مشخص شده است ولی در قارچ های اندوفیت هنوز شناسایی نشده است. در پژوهش حاضر، قارچ های اندوفیت از پوست درخت سرخدار ایران (taxus baccata) جداسازی و به روش نوک هیف خالص سازی شدند. dna ژنومی از قارچ ها و سرخدار استخراج شده و حضور ژن های ts، dbat و bapt (از ژن های کلیدی درگیر در مسیر بیوسنتزی تاکسول) بوسیله pcr بررسی گردید. توالی بدست آمده از این ژن ها با توالی های مشابه، در سطح نوکلئوتیدی و آمینواسیدی، همردیف گردید. ساختارهای دوم، سوم و خصوصیات بیوشیمیایی توالی پروتئینی این ژن ها با استفاده از پایگاه های اطلاعاتی و نرم افزارهای بیوانفورماتیکی پیش بینی گردید. ایزوله های قارچی در محیط مایع تخمیری کشت شده و حضور تاکسول در عصاره محیط کشت با استفاده از کروماتوگرافی لایه نازک بررسی گردید. ساختار تاکسول از قارچ های اندوفیت با تاکسول استاندارد با استفاده از طیف سنجی مادون قرمز مورد مقایسه و شناسایی قرار گرفت. پس از خالص سازی، 50 ایزوله قارچی از سرخدار جداسازی شد. استخراج dna ژنومی از ایزوله های قارچی و برگ های سرخدار با کمیت و کیفیت بالا صورت گرفت. از تکثیر ژن ts در سرخدار توالی 1047 نوکلئوتیدی بدست آمد که دارای شباهت بسیار بالایی، در سطح نوکلئوتیدی و آمینواسیدی، با گونه های دیگر سرخدار بود. این توالی با شماره دستیابی kc188793 در بانک ژن ثبت گردید. نتایج، حضور این ژن را در 19 ایزوله به اثبات رساند. حاصل تکثیر ژن dbat در سرخدار و ایزوله های اندوفیت یک قطعه 125 نوکلئوتیدی بود که دارای شباهت بسیار بالایی باهم و با توالی مربوط به ژن dbat گونه های دیگر سرخدار و دو قارچ اندوفیت شناخته شده مولد تاکسول بود. حضور این ژن در 47 ایزوله از 50 ایزوله کل مشاهده شد. حاصل تکثیر ژن bapt در سرخدار یک توالی 533 نوکلئوتیدی بود که شباهت بالایی با 4 توالی mrna ثبت شده در بانک ژن داشت. این توالی با شماره دستیابی kc218824 در بانک ژن ثبت گردید. این اولین بار است که توالی ژنومی bapt با حضور یک ناحیه اینترونی معرفی می گردد. حضور این ژن در 16 ایزوله قارچی به اثبات رسید. ساختارهای دوم و سوم و خصوصیات توالی پروتئینی هرسه آنزیم با استفاده از پایگاه ها و نرم افزارهای بیوانفورماتیکی پیش بینی شده و نواحی حفاظت شده و موتیف های مهم آنزیم های کد شده بوسیله این ژن ها مشخص گردید. نتایج کروماتوگرافی لایه نازک، تولید تاکسول در 8 ایزوله قارچ اندوفیت را به اثبات رساند. طیف سنجی مادون قرمز یکسان بودن ساختار تاکسول بدست آمده از کشت قارچ های اندوفیت و تاکسول استاندارد را تائید کرد. نتایج نشان داد که قارچ های اندوفیت جداسازی شده از سرخدار ایرانی قادر به تولید تاکسول در محیط کشت بوده و می توانند منبع جایگزین مناسبی جهت تولید این ترکیب باارزش در شرایط آزمایشگاهی به حساب آیند. حضور ژن های کلیدی مسیر بیوسنتزی تاکسول در تعدادی از قارچ ها به اثبات رسید. این نتایج می توانند راهی به سوی دستورزی های ژنتیکی برای بهبود تولید تاکسول باز نمایند.

تولید تاکسول و عوامل موثر در تولید آن در قارچ های اندوفیت گیاه فندق
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1391
  نوشین رحیمی   سنبل ناظری

تاکسول یک ترکیب دی ترپنوئیدی است که اولین بار از درخت سرخدار (taxus brevifolia) و بعدا از درختان دیگر مانند فندق (corylus avellana) جداسازی شد. تحقیقات نشان داده است که برخی قارچ های اندوفیت جداسازی شده از این گیاهان نیز قادر به تولید تاکسول هستند. ژن dbat یکی از ژن های کلیدی در مسیر بیوسنتزی تاکسول است که تشکیل باکاتینiii ، یکی از پیش سازهای اصلی در مسیر بیوسنتزی تاکسول، را کاتالیز می کند. از آنجا که غلظت تولید تاکسول در کشت سلولی گیاه و همچنین میکروارگانیسم ها پایین است، امروزه، از محرک ها برای غلبه بر این مشکل استفاده می شود، تا تولید متابولیت های ثانویه افزایش یابد. اهداف این تحقیق بررسی تولید تاکسول در قارچ های اندوفیت جداسازی شده از گیاه فندق و عوامل موثر بر تولید آن بودند. قارچ های اندوفیت از درختان فندق در منطقه ی فندق لو واقع در استان اردبیل، جداسازی و به روش نوک هیف خالص سازی شدند. dna ژنومی قارچ های اندوفیت به روش ctab، استخراج شد. حضور ژن dbat توسط واکنش زنجیره ای پلیمراز بررسی گردید. تولید تاکسول در کشت قارچ های حاوی ژن dbat ، به روش tlc (کروماتوگرافی لایه نازک) بررسی گردید. اثر محرک های عصاره ی قارچ آسپرژیلوس نایجر و اسید بنزوییک در تولید تاکسول مورد بررسی قرار گرفت. 70 ایزوله قارچی از اندام های مختلف درختان فندق جداسازی گردید. با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز و آغازگرهای اختصاصی، حضور ژن dbat در 12 ایزوله به اثبات رسید. بررسی تولید تاکسول در این ایزوله ها، توسط tlc، نشان داد که هفت ایزوله توانایی تولید تاکسول را در شرایط آزمایشگاهی داشتند. گروهی از قارچ های اندوفیت جدا شده از فندق، رویش یافته در شمال غرب ایران، حاوی ژن dbat، ژن مولد آنزیم کلیدی در مسیر بیوسنتزی، بودند و از آن میان تعدادی در شرایط آزمایشگاهی قادر به تولید تاکسول بودند. نتایج نشان داد که محرک های عصاره ی قارچ آسپرژیلوس نایجر و اسید بنزوییک بر تولید تاکسول در ایزوله-ی مورد آزمایش اثر منفی داشتند. به علاوه افزایش دمای بالا نیز اثر منفی در تولید تاکسول داشت.

تولید تاکسول در کشت کالوس و ریشه مویین (( القا شده توسط اگروباکتریوم ریزوژنز )) گیاه فندق جنگل های فندق لو
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1391
  مریم کلانتر پور دزفولی   سنبل ناظری

فندق (corylus avellana l.) به خاطر داشتن مقدار بالای روغن، اسیدهای چرب ضروری، استرول ها، آنتی اکسیدان ها و مواد معدنی دارای ارزش تغذیه ای بالایی است. تحقیقات نشان داده است که کالوس منبعی مناسب برای تولید متابولیت های ثانویه در شرایط ازمایشگاهی و کنترل شده است. دراین تحقیق القای کالوس در بذور اکوتیپ های مختلف فندق و القا ریشه مویین مورد بررسی قرار گرفتند. بذر های گیاهان از مناطق الموت، مغان، رامسر، آستانه، هشت پر و فندقلو جمع آوری گردیده و درشرایط in vitro ، ریزنمونه های بذری در پتری های مجزا حاوی محیط پایه ms به همراه غلظت های مختلف هورمون های رشد 2,4-d (5/0، 1 و 2 میلی گرم برلیتر) و bap (5/0 ،1، 2 و 5 میلی گرم برلیتر) کشت داده شدند. در این تحقیق از آزمایش فاکتوریل درقالب طرح کاملاتصادفی، در سه تکرار استفاده شد و نتایج با استفاده از نرم افزار spss بررسی گردید. بیشترین درصد کالوس زایی در اکوتیپ مغان تحت تیمار2 میلی گرم در لیتر 2,4-d و 5/0 میلی گرم در لیتر bap مشاهده شد. در اکوتیپ های الموت، مغان و فندقلو بیشترین درصدکالوس زایی و در اکوتیپ آستانه و هشت پر کمترین کالوس زایی مشاهده گردید. اکوتیپ های مختلف فندق، سطوح مختلف 2,4-d و bap و همچنین اثرات متقابل آن ها از نظر صفت کالوس زایی تفاوت معناداری داشتند. در برخی محیط ها بافت های جنین مانندی تشکیل شد که توانایی تبدیل به گیاه کامل را داشتند. سوسپانسیون سلولی از کالوس های 2 ماهه ی ترد و سفید رنگ در محیط ms دارای هورمون های مشابه تهیه شد. وجود تاکسول در کشت سلولی فندق، درون و برون سلولی، توسط کروماتوگرافی لایه نازک پس از گذشت 8 هفته اثبات شد. وجود تاکسول به غلظت هورمون های مورد استفاده بستگی نداشت. گونه corylus avellana از دو اکوتیپ الموت و همدان جهت القای ریشه مویین توسط باکتری خاکزی آگروباکتریوم ریزوژنز استرین های a7، a4 و a15837 مورد مطالعه قرار گرفتند. ریزنمونه های قطعات شاخه، برگ ها، جنین و جوانه های جوان با اگرو باکتریوم تلقیح شد. جهت افزایش انتقال ژن t-dna به ریزنمونه ها، ترکیبات مختلفی از قبیل: نیترات نقره، کلریدکلسیم، وانیلین، اسید کوماریک و سیستئین و همچنین تراکم های متفاوت باکتری طی دوره هم کشتی استفاده شد. با تمام کوشش های انجام گرفته ریشه مویین در تحقیق حاضر تشکیل نگردید.

مطالعه برخی اثرات زیستی مواد طبیعی قارچ های اندوفیت سرو
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1391
  مهدیه حسینی مقدم   جلال سلطانی

اندوفیت ها امروزه به عنوان منبعی برای تولید محصولات زیستی طبیعی معرفی شده اند و دارای پتانسیل های کاربردی فراوان در پزشکی، کشاورزی و صنعت هستند. گیاهان تیره ی سرو از گیاهان بومی ایران و جزو کهنسال ترین درختان ایران می باشند. مهم ترین جنس های موجود در ایران از این خانواده cupressus، juniperus وplatycladus هستند. با توجه به سلامت بالای این گیاهان طی این حضور دیرین در اقلیم های متنوع کشور احتمال همراهی و محافظت شدن آن ها توسط قارچ-ها و باکتری های همزیست وجود دارد. لذا پژوهش حاضر از دیدگاه های بیولوژیک، اکولوژیک و فارماکولوژیک به شناسایی اندوفیت های این گیاهان و بررسی مواد موثره آن ها پرداخته است. به این منظور، جمع آوری نمونه های گیاهی در طی فصل بهار، تابستان و پاییز سال 1390 خورشیدی، از اندام های سالم درختان سروناز (c. sempervirens var. cereiformis)، سروشیراز (c. sempervirens var. fastigiata)، سرونقره ای (cupressus arizonica)، سروخمره ای (platycladus orientalis)، سرو زربین (c. sempervirens var. horizontalis) و سروکوهی (juniperus communis) در رویشگاه های طبیعی استان های فارس، گیلان، مرکزی و همدان انجام شد. نمونه ها پس از انتقال به آزمایشگاه و ضدعفونی، کشت داده شدند و قارچ ها و باکتری های جداسازی شده، خالص گردیدند. در این پژوهش 110 جدایه ی اندوفیت قارچی از کشت 820 قطعه ی گیاهی جداسازی شد و نرخ کلونیزاسیون 7/13 درصد محاسبه شد. شناسایی قارچ های اندوفیت به روش های ملکولی و میکروسکوپی صورت گرفت. جهت بررسی اثرات زیستی قارچ های اندوفیت، استخراج متابولیت های ثانویه داخل سلولی و خارج سلولی آن ها صورت گرفت. نتایج نشان داد که متابولیت های مذکور دارای اثرات ضدتکثیر سلولی و ضدقارچی بر روی قارچ مدل pyricularia oryzae و دارای اثرات ضدباکتریایی بر روی باکتری های گیاهی pseudomonas syringae، erwinia amylovora و bacillus sp. بودند. جهت بررسی قدرت بیوکنترلی اندوفیت ها، از کشت دو طرفه ی جدایه های اندوفیت قارچی با سه قارچ پاتوژن سرو یعنی diplodia seriata ، phaeobotryon cupressi و spencermartinsia viticola استفاده شد. تمامی جدایه های اندوفیت قارچی اثرات بازدارندگی از رشد پاتوژن ها را در سطح آزمایشگاهی نشان دادند. همچنین در این پژوهش 69 جدایه ی اندوفیت باکتریایی جداسازی شدند و پس از بررسی تنوع جدایه ها بر اساس میزبان، بافت گیاهی و منطقه ی جغرافیایی، اثرات ضدقارچی آن ها بر قارچ مدل p. oryzae نشان داده شد. در این پژوهش علاوه بر کشف گونه هایی با اثرات زیستی مفید، تعداد 12 گونه ی جدید برای فلور قارچی ایران معرفی شد. همچنین برای نخستین بار در سطح دنیا، قارچ های اندوفیت سرمادوست جداسازی شدند که دارای توانایی تولید متابولیت های ثانویه در دماهای نزدیک به صفر درجه سانتیگراد بودند.

اثرات ضد میکروبی و آنتی اکسیدانی عصاره گیاه تاتوره (datura innoxia)
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده کشاورزی 1392
  عاطفه رضایی ستار   سنبل ناظری

گیاهان دارویی از هزاران سال پیش منابع مهمی برای تولید دارو بوده اند. تنوع فوق العاده گیاهان و امکان وجود ترکیبات شیمیایی متنوع در آن ها، شناسایی و بررسی اثرات گوناگون بیولوژیکی در این گیاهان را ضروری می سازد. تاتوره (datura sp.) از خانواده سولاناسه از حدود نیم قرن پیش به عنوان گیاهی با اثرات مفید دارویی کشت می شود. این گیاه حاوی چندین متابولیت ثانویه مهم است. اسکوپولامین و هیوسیامین، متابولیت های اصلی این گیاه، آثار پاراسمپاتیک دارند. هدف پژوهش حاضر بررسی فعالیت ضد میکروبی عصاره های اتانولی، متانولی و هیدروالکلی برگ های تاتوره به روش انتشار دیسک علیه هشت سویه باکتری و چهار جدایه قارچ بیماری زا و همچنین تعیین مقادیر mic وmbc این عصاره ها به روش رقت لوله ای بود. بر اساس نتایج حاصل، عصاره اتانولی بر طیف گسترده تری از باکتری ها تأثیر داشت و بزرگ ترین قطر هاله ممانعت از رشد تحت تأثیر عصاره هیدروالکلی به دست آمد. همچنین مشخص شد که عصاره هیدروالکلی در غلظت های کمتری در مقایسه با دو عصاره اتانولی و متانولی، باعث مهار رشد باکتری های مورد سنجش شد. نتایج ارزیابی خواص ضد قارچی عصاره گیاه تاتوره نشان داد که این گیاه اثر بازدارنده ای بر رشد قارچ های مورد بررسی نداشته است. ارزیابی خواص آنتی اکسیدانی عصاره متانولی به روش dpph انجام و مشخص شد که ic50 آن با ic50 اسید آسکوربیک قابل مقایسه است.

متابولیت های ثانویه در محیط کشت کالوس و ریشه مویین گیاه بنگ دانه
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1392
  رسول نجیبی   اصغر میرزایی اصل

گیاهان دارویی یکی از مهم ترین منابع دارویی هستند که از هزاران سال پیش کاربرد داشته اند. گیاه بنگ دانه از راسته ((asterales و تیره (solanaceae) با عدد کروموزومی 28=x2=n2 می باشد. این گیاه از جنس hyoscyamus ssp.)‎) و با نام گونه ی (hyoscyamus niger) شناخته می شود. اهمیت بالای این گیاه دارویی به دلیل وجود تروپان آلکالوئیدهایی همچون هیوسیامین و اسکوپولامین می باشد که از اندام های مختلف این گونه استحصال می شود و از ارزش دارویی و اقتصادی بالایی برخوردار هستند. با توجه به سرعت آهسته تولید متابولیت های ثانویه در طبیعت و مدت زمان طولانی برای تولید آن ها و نیز اقتصادی نبودن میزان تولید این ترکیبات، استفاده از فنون کشت بافت گیاهی برای تولید سریع و انبوه متابولیت های ثانویه و مواد دارویی ضروری به نظر می رسد. در تکنیک کشت ریشه مویین، باکتری آگروباکتریوم رایزوژنز قادر برای القای ریشه های مویین در تعدادی از میزبان های گیاهی است، از این ریشه ها می توان به عنوان منبعی برای تولید مواد دارویی استفاده نمود. در گیاه بنگ دانه از کشت کالوس نیز به منظور تولید متابولیت های ثانویه استفاده می شود. برای بدست آوردن گیاهچه های استریل، بذور 10 دقیقه در مجاورت اسید سولفوریک غلیظ و سپس بروی محیط کشت ms حاوی جیبرلیک اسید (240 میلی گرم در لیتر) قرار گرفتند. گیاهچه های 4-5 برگی جهت القاء کالوس و ریشه مویین مورد استفاده قرار گرفتند. جهت القاء ریشه های مویین از هفت سویه باکتری آگروباکتریوم رایزوژنز، ar15834، a4، ar318، lba9402، a7، d7 و ar9534 و ریزنمونه های برگ، ساقه و ریشه، و جهت القاء کالوس نیز از غلظت های مختلف naa و bap و ریزنمونه های برگ، ساقه و ریشه استفاده شد. بیش ترین القاء ریشه مویین در ریزنمونه برگ و با استفاده از سویه ar15834، به میزان 33/63 درصد مشاهده شد. تأیید تراریختی ریشه های مویین با تکثیر قطعه ای از ژن rolb توسط آغازگرهای اختصاصی این ژن، و با استفاده از واکنش pcr انجام شد. همچنین بیش ترین القاء کالوس در ریزنمونه های برگ و بیش ترین وزن تر کالوس در محیط ms جامد حاوی (2 میلی گرم در لیتر naa و 5/0 میلی گرم در لیتر (bap مشاهده شد. نتایج حاصل از hplc نشان داد که تروپان آلکالوئید غالب در ریشه های مویین و کالوس گیاه بنگ دانه هیوسیامین می باشد.

بررسی اثر ضد میکروبی و آنتی اکسیدانی عصاره اندام های مختلف و شناسایی فیتو شیمیایی برخی متابولیت های ثانویه بالنگ (citrus medica) و دارابی (citrus grandis)
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1392
  محدثه شجاعی مهر   سنبل ناظری

امروزه پدیده مقاومت به آنتی بیوتیک، نیاز مستمر و فوری برای کشف ترکیبات جدید ضد میکروبی با ساختار شیمیایی متنوع برای درمان بیماری های عفونی جدید را ایجاد کرده است. همچنین به دلیل اثرات سمی و سرطان زایی آنتی اکسیدان-های مصنوعی، نیاز به یک جایگزین طبیعی وجود دارد. لذا محققان، به دلیل ترکیبات ناشناخته بیولوژیکی فعال ، عوارض جانبی کمتر، هزینه نسبتا کم و اثربخشی بیشتر آنها در طب سنتی، توجه خود را به گیاهان دارویی معطوف کرده اند. در سال های اخیر خواص ضد میکروبی گیاهان دارویی به طور فزاینده ای در سراسر جهان گزارش شده است. مرکبات متعلق به خانواده rutaceae و زیر خانواده aurantioidae هستند. در این بررسی دو گونه مرکبات شامل citrus medica l و citrus grandis l.osb با نام های انگلیسی citron و pomelo و نام ¬های فارسی بالنگ(بادرنگ) و دارابی ، مطالعه شدند. هدف پژوهش حاضر بررسی فعالیت ضد میکروبی عصاره¬های متانولی، هیدروالکلی، آبی برگ، پوست رنگی، پوست سفید، بذر ، ریشه و اسانس برگ و پوست رنگی به روش انتشار چاهک در آگار علیه ده باکتری بیماری زای انسانی و دو باکتری بیماری¬زای گیاهی و همچنین تعیین مقادیر mic وmbc به روش رقت لوله¬ای بود. بر اساس نتایج حاصل، عصاره متانولی بر طیف گسترده¬تری از باکتری¬ها تأثیر داشت . نتایج نشان داد که باکتری¬های گرم مثبت نسبت به باکتری¬های گرم منفی به عصاره¬ها حساسیت بیشتری داشتند. عصاره پوست رنگی، برگ و ریشه هر دو گونه بهتر از بافت های دیگر عمل کردند.فعالیت ضد میکروبی ، خاصیت ضد باکتریایی و خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره و اسانس و همچنین میزان فنول و فلاونوئید عصاره های هر دو گونه بررسی گردید

اثر ضد میکروبی عصاره های آبی و الکلی اندامهای مختلف (برگ، ساقه و گل) و بررسی تنوع ژنتیکی سیاه گینه dendrostellera lessertii
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1393
  مصطفی علم هولو   سنبل ناظری

به علت مقاومت میکروارگانیسم¬ها در برابر سموم وآنتی بیوتیک¬ها استفاده از گیاهان دارویی جهت دستیابی به ترکیبات جدید و غلبه بر باکتری¬های بیماری¬زا ضروری بنظر می رسد. با افزایش اطلاع افراد از عوارض جانبی خطرناک آنتی-بیوتیک¬های سنتتیک، میزان تقاضا برای جایگزینی طبیعی این داروها افزایش پیدا کرده است. سیاه گینه تنها گونه جنس دندروستلرا در ایران است. این گیاه از خانواده تیمیلئاسه شامل گیاهان چند ساله با ساقه¬های چوبی به ارتفاع 20-60 سانتی-متر که در مناطق شمال و شمل¬غرب کشور انتشار دارد. نمونه¬ها از استان همدان در ارتفاع 1961 متر در تابستان سال 1392جمع آوری شدند. نمونه¬ها در دمای اتاق و دور از نور مستقیم خورشید در سایه خشک شدند. عصاره¬های مختلف به روش خیساندن تهیه شدند. اثرات ضدباکتریایی به روش انتشار چاهک در آگار ، mic ( به روش رقت لوله¬ای) و mbc مشخص شدند. خواص آنتی¬اکسیدانی به روش dpph و میزان فنول و فلاونوئید به ترتیب به روش فولین سیو¬کالتو و آلومینیوم کلرید اندازه¬گیری شدند. ترکیبات عصاره متانولی ساقه، ریشه و برگ توسط گاز کروماتوگرافی متصل به طیف ¬سنج جرمی مشخص شدند. باکتری¬های باسیلوس سابتیلیس و باسیلوس سرئوس در مقایسه با دیگر باکتری¬ها حساسیت بیشتری نشان دادند. بیشترین میزان فنول و فلاونوئید کل عصاره متانولی ریشه به ترتیب 69/2± 8/111 (mgga/g) و35/0±25/2(mgq/g) مشاهده شد. اختلاف معنی¬دار بین ic50 عصاره متانولی بافت¬های مختلف با آسکوربیک اسید مشاهده نشد. نتایج gc/ms نشان داد،که عصاره متانولی سیاه گینه حاوی ترکیباتی با خاصیت آنتی¬باکتریایی مانند تیمول، یوگنول، فیتول، بوتریک اسید است. خاصیت بازدارندگی عصاره¬ بافت¬های مختلف این گیاه علیه رشد باکتری¬های مورد مطالعه می¬تواند به علت حضور این ترکیبات باشد. شناخت تنوع ژنتیکی و طبقه¬بندی ذخایر توارثی (ژرم پلاسم) از فعالیت¬های مهم و ضروری در مدیریت حفظ ذخایر ژنتیکی گیاهان هستند. در این پژوهش تنوع ژنتیکی 12 ژنوتیپ جنس¬های سیاه گینه و دافنه جمع¬آوری شده از 10 استان کشور با استفاده از نشانگر¬های issr بررسی گردید. از 12 آغازگر، که دارای توالی¬های تکراری ساده (ریزماهواره¬ای) بودند، برای تکثیر قطعاتی از dna ژنومی استفاده شد.. 88 مکان چند شکل امتیاز بندی شدند. برای ارزیابی تشابه ژنتیکی میان ژنوتیپ-ها از روش تجزیه خوشه¬ای با استفاده از ضریب تشابه جاکارد با روش upgma استفاده گردید. میانگین محتوی اطلاعات چندشکلی و شاخص نشانگر به ترتیب 86/0 و 45/6 بودند. آغازگر p9 بالاترین میزان pic (93 درصد) و آغازگر p6 بالاترین میزان mi(04/11) را داشت. سهم تنوع ژنتیکی داخل گروه¬ها در تنوع ژنتیکی کل بیشتر از تنوع ژنتیکی بین گروه¬ها برآورد گردید(85 درصد در مقابل 15 درصد). نتایج این تحقیق نشان داد که نشانگر¬هایissr بطور موثری می¬توانند برای مطالعه تنوع ژنتیکی ژنوتیپ¬های سیاه گینه و دافنه استفاده شوند. از میان آغازگرهای استفاده شده آغازگر p9 با picبالا مناسب¬ترین آغازگر برای مطالعات بعدی تشخیص داده شد.

اثر ضد باکتریایی عصاره آبی و الکلی بذور گیاهان بلوط ایرانی، بنه و چشوم علیه برخی باکتری های بیماری زای گیاهی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1393
  یوسف امرایی   سنبل ناظری

امروزه مسئله اصلی در کشاورزی مدرن عدم استفاده از سموم شیمیایی است، زیرا استفاده از سموم شیمیایی باعث مقاوم شدن عوامل بیماری¬زا در برابر سموم شیمیایی می¬شود. علاوه بر این استفاده از سموم شیمیایی دارای هزینه بالا و اثرات مخرب زیستمحیطی است. قارچکشها نیز همانند سایر سموم شیمیایی دارای اثرات زیست محیطی بوده و از لحاظ واکنشهای مختلف، نه تنها علیه عوامل بیماری¬زا وارد میشوند، بلکه ممکن است روی فعالیت میکروارگانیسمهای غیر هدف خاک نیز تاثیر بگذارند و گاهی نیز ممکن است بعضی بیمارگرها نسبت به برخی سموم شیمیایی مقاومت پیدا کنند. استفاده از گیاهان دارویی به عنوان مواد بیولوژیکی که منبعی غنی از عوامل ضدمیکروبی هستند می¬تواند در روش مبارزه بیولوژیکی مورد استفاده قرار گیرد. دراین مطالعه اثر ضدباکتریایی عصارههای آبی و الکلی( اتانولی، متانولی) و آبی الکلی بذور گیاهان بلوط ایرانی، بنه و چشوم ارزیابی و با دو سم قارچکش (باکتریکش) اکسیکلرومس( 6 و 3 در هزار ) و بردوفیکس ( 10 و 5 در هزار) و دو آنتیبیوتیک جنتامایسین، سیپروفلوکساسین مقایسه شد. عصارهگیری از بذور آسیاب شده گیاهان با استفاده از نسبتهای مساوی از آب و متانول (عصاره آبیمتانولی)، آب و اتانول (عصاره آبی اتانولی)، آب مقطر استریل (عصاره آبی)، اتانول (عصاره اتانولی) و نیز متانول (عصاره متانولی) انجام شد. اثرات ضدباکتریایی هر یک از گیاهان به روش¬ انتشار در آگار بر روی یک باکتری گرم مثبت و چهار باکتری گرم منفی بیما ریزای گیاهی بررسی شدند. نتایج نشان داد که هر سه گیاه دارای فعالیت ضدباکتریایی قابل توجهی علیه باکتری¬ها به خصوص علیه باکتری clavibacter michiganensis. susbp sepedonicum بود. در این تحقیق غلظت 150 میلیگرم در میلیلیتر از عصارهمتانولی در کشت همه باکتریها، بیشترین قطر هاله ممانعت از رشد باکتری را تشکیل داد. در تمامی غلظت های عصاره های مختلف بذور هر سه گیاه، هاله بازدارندگی در کشت باکتری های گرم منفی pectobacterium carotovorum و ralstonia solanacearum دارای کمترین مقدار بود. اثر متقابل فاکتورهای غلظت، باکتری و عصاره در این پژوهش معنیدار بود. همچنین تعیین مقادیر mic وmbc به روش رقت لوله¬ای انجام شد. تحت شرایط آزمایشگاه عصاره ها، اثرات ضدباکتریایی مطلوبی را نسبت به سموم شیمیایی و آنتیبیوتیکها از خود نشان دادند. بنابراین تحت شرایط گلخانه اثر ضد باکتریایی عصاره متانولی بلوط ایرانی ( که نسبت به سایر عصاره ها دارای اثر ضدباکتریایی بیشتری بود) را در مقایسه با سموم اکسیکلرمس، بردوفیکس و جنتامایسین بر روی باکتری ralstonia solanacearum ( گیاه گوجهفرنگی به عنوان میزبان باکتری) بررسی شد. نتایج گلخانهای نشان داد، غلظت 75 میلیگرم در میلیلیتر عصاره متانولی بلوط ایرانی اثری بیشتر از اکسی کلرو مس 5/1 در هزار، مشابه بردو فیکس 5 در هزار و جنتامایسین10 در هزار در جلوگیری از خسارت باکتری ralstonia solanacearum بر روی گیاه گوجه فرنگی داشت. ترکیبات موجود در عصاره متانولی این بذرها با استفاده از دستگاه کروماتوگرافی گازی شناسایی شد و مشخص گردید که عصاره حاوی مقادیر قابل توجهی از ترکیبات فنلی است که می تواند اثر ضد میکروبی عصاره را توجیح کند.

بهینه سازی انتقال ژن coda از باکتری arthrobacter globiformis به گوجه فرنگی lycopersicon esculentum millبا استفاده از agrobacterium tumefaciens
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1386
  لیلا جدی   سنبل ناظری

چکیده ندارد.

جداسازی و شناسایی مولکولی گونه های مختلف جلبک جنس دونالیلا (dunaliela) از دریاچه گاوخونی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1386
  ناهید حسین زاده   سنبل ناظری

چکیده ندارد.

جداسازی و شناسایی مولکولی گونه های مختلف جلبک جنس دونالیلا (dunaliella) از دریاچه گاوخونی
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1386
  ناهید حسین زاده   سنبل ناظری

چکیده ندارد.

بررسی اثر ضد باکتری، ضد اکسیدانت و سمیت عصاره گیاهان همیشه بهار calendula officinalis و بومادران achillea millefolium در شرایط in vitro
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه بوعلی سینا - دانشکده علوم کشاورزی 1387
  وحید خزایی   سنبل ناظری

چکیده ندارد.