نام پژوهشگر: افسانه گل کار نارنجی

اثر عصاره گیاه شقایق بر بلوغ و تکوین تخمک های نارس موش
thesis وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان - دانشکده کشاورزی گنبد 1389
  افسانه گل کار نارنجی   حسین ایمانی

بلوغ تخمک خارج از بدن روشی آسان و ارزان جهت تولید جنین خارج از بدن در انسان و حیوانات می باشد. در شرایط خارج از بدن، تخمک در معرض غلظت های اکسیژن بیشتری قرار می گیرد که خطرتولید گونه های فعال اکسیژن را در تخمک بالا می برند. بعلاوه، تولید گونه های فعال اکسیژن در شرایط بدنی نیز اجتناب ناپذیر بوده و می تواند موجب اثرات مخرب برتولید مثل شود. استفاده از آنتی اکسیدان ها در محیط کشت بلوغ می تواند مانع تولید بیش از حد گونه های فعال اکسیژن شود. همچنین مصرف آنتی اکسیدان ها می تواند مانع اثرات مخرب گونه های فعال اکسیژن شود. هدف از این تحقیق، بررسی استفاده از عصاره گیاه شقایق بعنوان یک آنتی اکسیدان طبیعی در محیط کشت بلوغ تخمک و بررسی اثرات مصرف این عصاره گیاهی بر عملکرد تخمدان های موش ماده می باشد. تخمک های نابالغ جمع آوری شده و بطور تصادفی به محیط های کشت بلوغ حاوی غلظت های مختلف عصاره شامل 100 و 200 میکروگرم در هر میلی لیتر) انتقال ، 50، 20 و 25 میکروگرم در هر میلی لیتر) و ( 0 ،15 ،10 ، دو گروه ( 0 داده شدند. طی بلوغ تخمک خارج از بدن، تعداد تخمک ها در مرحله وزیکول ژرمینال، تجزیه وزیکول ژرمینال و متافازی ثبت و پس از لقاح خارج از بدن، میزان لقاح تخمک های متافازی، اندازه گیری شد. در ارزیابی تکوین جنین ها طی یک دوره 96 ساعته، تعداد جنین های دو سلولی، چهار تا هشت سلولی، مورولا و بلاستوسیست ثبت شد. 100 و 200 میلی گرم در هر کیلو گرم وزن بدن به مدت 12 روز به صورت صفاقی به موش های ماده ،50 ، دوزهای 0 تزریق شده و با تحریک تخمک گذاری، میزان لقاح و تکوین تخمک های تیمار شده و شاهد ارزیابی و دوز تاثیرگذار تعیین گردید. توانایی بلوغ، لقاح و تکوین خارج از بدن تخمک های نابالغ تخمدان های تیمار شده با دوز موثر و گروه شاهد نیز ارزیابی شد. عملکرد تخمدان های تیمار شده با دوز موثر طی رنگ امیزی هماتوکسیلین-ائوزین نیز مورد بررسی قرار گرفت. کلیه آزمایشات 7 بار تکرار و داده ها با استفاده از طرح کاملاً تصادفی، آنالیز شدند. مقایسات میانگین ها با آزمون دانکن و در سطح معنی داری 5% انجام شد. از میان غلظت های آزمایش شده اضافه کردن 100 میکروگرم عصاره در هر میلی لیتر محیط کشت موجب افرایش معنی داری در بلوغ و تکوین خارج از بدن تخمک ها تزریق 200 میلی گرم در کیلوگرم عصاره گیاه شقایق به موش های ماده موجب .(p <% در مقایسه با گروه شاهد شد ( 5 افزایش معنی داری در توانایی تکوین خارج از بدن تخمک های حاصل از تحریک تخمک گذاری نسبت به گروه شاهد میزان بلوغ و تکوین خارج از بدن تخمک های تیمار شده با دوز موثر تفاوت معنی داری با گروه شاهد .(p <% شد ( 5 بررسی های بافت شناسی نشان داد که تعداد فولیکول های پرایمری در تخمدان های تیمار شده بطور .(p>% نداشت ( 5 همچنین در بررسی کیفی میزان آپوپتوزیس، تفاوتی میان تخمدان گروه .(p <% معنی داری بالاتر از گروه شاهد بود ( 5 تیمار شده و تخمدان گروه شاهد، مشاهده نشد. نتایج حاصل از آزمایشات نشان داد اضافه کردن عصاره گیاه شقایق به محیط کشت بلوغ تخمک موجب افزایش میزان بلوغ و تکوین تخمک ها می شود. همچنین توانایی بالاتر تخمک های بدست آمده از تخمدان های تیمار شده با دوز موثر در تکوین تا مرحله بلاستوسیست، نشانه کیفیت بهتر نشان دهنده تاثیرگذاری عصاره بر ،in vivo و in vitro تخمک های تیمار شده با عصاره شقایق می باشد. آزمایشات بلوغ تخمک می باشد که این اثرات به میزان مورد استفاده عصاره بستگی دارد. این اثرات افزاینده ممکن است بدلیل خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره گیاه شقایق باشد.