نام پژوهشگر: رضا گلیجانی مقدم
سمانه براری یازارمحله رضا گلیجانی مقدم
ژن p73 از نظر عملکرد و ساختار مشابه ژن p53 بوده و در توقف سیکل سلولی و آپوپتوزیز نقش مهمی دارد. پلی مورفیسم این ژن روی بیان ژن اثرگذار می باشد در نتیجه از نظر عملکرد بسیار حایز اهمیت می باشد. در این مطالعه وجود رابطه بین پلی مورفیسم ژن و خطر ابتلا به بیماری پسوریازیس و این که آیا بین پلی مورفیسم و loh و خصوصیات پاتولوژیکی پزشکی بیماران ارتباط معناداری وجود دارد، مورد بررسی قرار گرفته است. از نمونه های تهیه شده از بیماران و نمونه های سالم (خون محیطی) استخراج dna صورت گرفت. نمونه های مورد بررسی شامل بیمار (115=n) ، سالم (161=n) بوده است. تمام نمونه های بیمار از بیمارستان امام خمینی تهران جمع آوری شده ، سن، جنس، نوع بیماری، شدت بیماری، التهاب مفاصل پسوریازیسی از متغیرهای مورد بررسی در این مطالعه بوده است. نتایج حاصل از بررسی پلی مورفیسم gc/at در ژن p73 با خطر ابتلا به بیماری پسوریازیس، ارتباط معناداری را نشان می دهد و رابطه معناداری از loh در ژن مشخص است. تعداد ژنوتیپ ها 63% برای تیپ وحشی (gc/gc) ، 31% برای هتروزیگوت (gc/at)، 6% برای ژنوتیپ موتانت (at/at) در بیماران و 79% برای تیپ وحشی، 19% برای هتروزیگوت و 2% برای تیپ مغلوب در افراد سالم مشاهده گردید. تعداد ژنوتیپ های گوناگون در افراد کنترل سالم و بیماران به طور مشخصی متفاوت بود (015/0p=). افراد بیمار حامل آلل at معمولا درجات شدیدتری از بیماری را نشان می دادند. در مطالعه اخیر مشخص گردید که انواع ژنوتیپ های حامل آلل at ارتباط قوی با بیماری پسوریازیس و ویژگی های کلینیکالی بیماران دارد در حالی که افراد دارای ژنوتیپ gc/gc از لحاظ شدت بیماری درجات بالایی را نشان می دهند، همچنین التهاب مفاصل بیشتر در افراد دارای ژنوتیپ gc/at مشاهده شده است.
رضا گلیجانی مقدم مصطفی مطلبی
بیماری های قارچی از بزرگترین عواملی هستند که باعث افت شدید عملکرد در محصول می شوند. در این تحقیق بهینه سازی کشت بافت و شرایط انتقال ژن به گیاه کلزا لاین r line hyola 308 انجام پذیرفت. در بهینه سازی کشت بافت با انتخاب غلظت mg/l bap5/3 میزان باززایی به 112 درصد رسید. سه پارامتر مهم در انتقال ژن توسط آگروباکتریوم شامل زمان پیش کشت، زمان هم کشتی و غلظت استوسیرینگون مورد بررسی قرار گرفت. با استفاده از ژن gus که در وکتور pbi121 تحت بیان پروموتر camv 35s بود شرایط بهینه برای انتقال ژن بدست آمد. با بهینه سازی زمان پیش کشت به 48 ساعت، زمان هم کشتی باآگروباکتریوم به 48 ساعت و غلظت استوسیرینگون به 100 میکرومول میزان انتقال ژن از حد پایه 4 درصد به 33 درصد افزایش یافت. در مرحله بعد ژن کیتیناز36 همسانه سازی شده دروکتور pbi121 (pbimy3)، از طریق آزمون pcr و الگوی هضم آنزیمی مورد تأیید قرار گرفت. این پلاسمید نوترکیب به دو لاین r line hyola308 و rgs003 از طریق انتقال بوسیله آگروباکتریوم منتقل گشت. به منظور انتقال ژن به گیاه کلزا از برگ های لپه ای گیاهان 5 روزه با طول دمبرگی حدود 2 میلیمتر که جوانه انتهایی آنها به طور کامل حذف گردیده بود استفاده گردید. نمونه ها به محیط انتخابی حاوی کانامایسین و سفاتوکسیم منتقل گشتند. گیاهان تراریخت به علت وجود ژن مقاومت به کانامایسین می توانستند در این محیط تشکیل نوساقه های سبز رنگ دهند. حضور ژن کیتیناز 36 در گیاهان بدست آمده با استفاده از آزمون pcr با آغازگرهای اختصاصی chit36f/chit36r، rt-pcr، آزمون لکه گذاری dna، آزمون زیست سنجی و آزمون مطالعه فعالیت آنزیمی علیه قارچsclerotinia sclerotiorum اثبات گردید.