چکیده: همه گـیری آنـفلوآنزا یکی از بزرگترین عوامل تهدید کننده سلامت در انـسان و حیوان به شمار می آید. دو همه گیری بزرگ از سویه های ویروس آنفلوآنزا h5n1 وh1n1 در طول سال های اخیر منجر به توجه بیشتر به ویروس سبب شونده و اجزاء پروتئین های عمده ویروس شده است. در این مطالعه، ما برای بیان پروتئین m2 از ویروس آنفلوآنزا نوع a در لاین سلولیct-26 بوسیله وکتور پلاسمیدی pegfp-n1 تلاش نمودیم و سپس ما شروع به مطالعه پاسخ های ایمونولوژیکی لاین سلولی ct-26 تغییرشکل یافته یا ترانسفورم شده در موش های آزمایشگاهی کردیم. ضمناً سویه واکسینال h9n2 (a/chicken/iran/101/1998) از موسسه تحقیقات سرم سازی و واکسن سازی رازی بدست آمده بود. (rvsri) orf (open reading frame) ژن m2 بوسیله تکنیک مولکولی rt-pcr و با استفاده از آغازگرهایی که شامل دو سایت اختصاصی آندونوکلئازی برشی می باشد، جدا شده بودند. ژنm2 جدا شده در پلاسمید بیان کننده pegfp-n1 کلون شده و پلاسمید فوق با استفاده از لیپوفکتامین 2000 جهت تغییرشکل لاین سلولی ct-26 استفاده شد. لاین سلولی ct-26 باعث ایجاد تومور کولون در موش balb/c می شود که با تغییرشکل و بیان ژن m2 ویروس در این سلول ها،آن ها می توانند جهت بررسی پاسخ های ایمونولوژیکی برعلیه تومور در مایه کوبی انجام شده در موش balb/c استفاده شوند. موش های مایه کوبی شده که حاوی آنتی بادی بر علیه ژن m2 است پس از تزریق داخل صفاقی با لاین سلولیct-26 تغییرشکـل یافته، در موش تومور کولون ایجـاد نشده یا در صورت ایجاد تومور اندازه آن از حالت طبیعی کوچکتر است.

یکی از دلایل استفاده از پروتئین m2e برای ساخت واکسن آنفلوانزا a توانایی منحصر به فرد آنهاست. از این رو برای افزایش مقاومت و ایمنی یک راه موثر مصون باقی ماندن پروتئین m2e است. به نظر می رسد که ما می توانیم با اتصال این m2e-peptide به یک ناقل مناسب مانند hsp70(c-ter) مایکوباکتریوم توبرکلوزیس آن را مقاوم کنیم. بنا بر گزارشات قبل ،این تحقیق در نظر دارد از ترکیب پروتئین m2e از ویروس آنفلوانزا a با ناحیه c-ter ، hsp70 مایکوباکتریوم توبر کلوزیس به عنوان یک حامل و ادجوانت یک پروتئین فیوژن نوترکیب جدید بدست آورد. ما ژنهای m2e و hsp70 را به هم متصل کردیم و سپس درون وکتور بیانی پروکاریوت ppiczb وارد کردیم. صحت و انطباق کلونینگ ژن با pcr ، هضم آنزیمی و تعیین توالی ژن تایید شد.