ایران از ابتدای دوره قاجاریه وارد مناسبات نظام سرمایه دارای و استعماری گشت. دو کشور روسیه و انگلستان از ابتدای دوره قاجار بتدریج رقابت خود بر سر تسلط سیاسی و اقتصادی بر ایران را آغاز کردند. نتیجه چنین روابطی منجر به اعطای امتیازات بی حد و حصر و لجام گسیخته به دو کشور مزبور گردید. از بین رفتن استقلال ایران در کنار استبداد داخلی و ناکارآمدی نظم موجود در ایران منجر به شکلگیری نهضت مشروطه گردید. از آنجا که دخالت بیگانگان یکی از عوامل مهم در نهضت مشروطه بود حال انتظار می رفت با استقرار مجلس امر نظارت بر معاهدات و امتیازات خارجی چه در گذشته و چه در آینده، توسط نمایندگان به دقت مورد بررسی قرار گیرد. بررسی فوق در پی پاسخگویی به این سوال است که نقش اساسی مجالس اول تا چهارم درباره مسئله امتیازات واگذار شده به دول خارجی دردوره گذشته و به هنگام برپایی خود این مجالس چگونه بوده و چرا چنین مواضعی را اتخاذ نموده اند. برای پاسخگویی به چنین پرسشی با دو روش ترکیبی توصیفی و تحلیلی به بررسی داده ها پرداخته می-شود تا زوایای پیدا و پنهان این موضوع روشن شود. از همان ابتدای تدوین قانون اساسی، مشروطه خواهان با گنجاندن موادی در رابطه با روابط خارجی و اعطای امتیازات نشان دادند نظارت بر این امور را از واجبات کارکردی مجلس می دانند. در اصل بیست و چهارم قانون اساسی مقرر شده بود تمامی معاهدات، امتیازات و کنتراتهای داخلی و خارجی باید به تصویب مجلس برسد تا به صورت قانونی درآید. در طول ادوار یک تا چهارم مشروطه به کرات راجع به مسئله امتیازات خارجی بحث هایی به میان آمد و نمایندگان نظرات خود را اعلام می کردند. اما نکته اساسی در اینجاست که این مواضع به واسطه نابسامانی های کلی نظام مشروطه هیچ گاه جنبه عملی نمی یافت.

چکیده : trichoderma spp. به عنوان یکی از عوامل کنترل بیولوژیکی موثر بر علیه دامنه وسیعی از پاتوژنها مانند macrophomina phaseolina (tassi) goid شناخته می شود که از طریق استراتژی های گوناگونی از جمله تولید آنزیمهای تجزیه کننده دیواره سلولی (کیتیناز و گلوکاناز) فعالیت می کند. یکی از عوامل محدود کننده کاربرد جدایه های تریکودرما به عنوان عامل کنترل بیولوژیکی، پایین بودن میزان تاثیر آن در سطح مزرعه است. بر این اساس، دست ورزی های ژنتیکی با استفاده از ایجاد جهش به دنبال ارتقای پتانسیل آنتاگونیستی این قارچ به منظور بهبود قدرت کنترلی آن هستند. لذا تأثیرات القای جهش با استفاده از اشعه گاما با دز 250 gry بر روی میزان تولید آنزیم های کیتیناز و گلوکاناز در کلنی های حاصل از کنیدیوم های دو گونه trichoderma harzianum (rifai) و trichoderma viride (pers) در پژوهشکده تحقیقات کشاورزی و پزشکی هسته ای کرج در این مطالعه مورد ارزیابی قرار گرفت. از بین ده جدایه جهش یافته منتخب t. harzianum تنها در یکی از آنها میزان تولید آنزیم کیتیناز در مقایسه با شاهد (وحشی) کاهش نشان داد (جهش منفی) و 80% جهش ها تأثیر مثبت داشتند. در گونه t. viride جهش های مثبت بالاتر بوده و 9/90% جهش ها به افزایش تولید آنزیم کیتیناز منجر شدند. در ارزیابی از آنزیم گلوکاناز تنها 60% از جدایه های جهش یافته گونه t. harzianum دارای جهش مثبت بوده و سه جدایه دارای جهش منفی در گونه t. viride مشاهده شد. آزمون های کشت متقابل نشان دادند که هشت جدایه از گونه t. harzianum و ده جدایه از گونه t. viride از نظر آماری توانایی کنترل بیشتری در مقابل m. phaseolina نسبت به جدایه وحشی داشتنه اند. مطالعه پروفایل پروتئینی این جدایه های جهش یافته این تئوری را تقویت نمود که افزایش تولید آنزیمهای تجزیه کننده دیواره سلولی از طریق القای موتاسیون با اشعه گاما می تواند منجر به افزایش پتانسیل آنتاگونیستی در اکثر جدایه ها شود. سایر جدایه های جهش یافته با افزایش قدرت آنتاگونیستی علیه m. phaseolina که میزان بالاتری از تولید آنزیم را نشان نداده اند احتمالاً واجد جهش هایی در سایر مکانیسم های بیوکنترلی می باشند.

قارچ تریکودرما به عنوان یک عامل کنترل بیولوژیک موفق قادرند دامنه وسیعی از قارچ های پاتوژن گیاهی از جمله قارچ rhizoctonia solani (مهمترین عامل خسارت زا بر روی سبزی وصیفی) را کنترل نمایند. بالاترین میزان تولید آنزیم های تجزیه کننده دیواره (کیتیناز و گلوکاناز) که در فرآیند مایکوپارازیتسم قارچهای بیمارگر گیاهی موثرند در بین میکروارگانیسم ها به جنس تریکودرما تعلق دارد، لذا پتانسیل بیوکنترلی جدایه هایی که توانایی تولید این آنزیم ها در آنها بیشتر است بالاتر خواهد بود. کاربرد روش های مهندسی ژنتیک و ایجاد موتاسیون مستقیم در ژنوم trichoderma harzianum وtrichoderma viride (تولاس،1865) به منظور افزایش پتانسیل آنتاگونیستی این قارچ ازطریق افزایش فعالیت کیتینازها و گلوکانازها دارای مزیت هایی می باشد. در این مطالعه القای جهش در دو گونه t.harzianum وt. viride با دز 250 گری اشعه گاما در پژوهشکده تحقیقات کشاورزی و پزشکی هسته ای کرج مورد ارزیابی قرار گرفت. از بین ده جدایه جهش یافته منتخب t. harzianum تنها در دو جدایه میزان تولید آنزیم کیتیناز در مقایسه با شاهد (وحشی) کاهش نشان داد(جهش منفی) و 80% جهش ها تاثیر مثبت داشتند. در گونه t. viride در 81/81% جدایه ها ایجاد جهش در اثر پرتوتابی با اشعه گاما منجر به افزایش فعالیت کیتینازی آنها شده است و در 09/9% جدایه ها تفاوت معنی داری در قدرت تولید آنزیم مشاهده نشده است و تنها در 19/18% جمعیت موتانت حاصل فعالیت کیتینازی کاهش یافته که جهش نامطلوب به شمار می رود. ارزیابی فعالیت آنزیم گلوکاناز نشان داد که در جدایه های جهش یافته گونه t. harzianum چهار جدایه به میزان 40% دارای جهش مثبت بوده و شش جدایه به میزان 60% دارای جهش منفی بوده است و در جدایه های جهش یافته t. viride نه جدایه به میزان 81/81% دارای جهش مثبت و دو جدایه به میزان 19/18 دارای جهش منفی بوده اند. آزمون های کشت متقابل نشان دادند که هفت جدایه از گونه t. harzianum و ده جدایه از گونهt. viride از نظر آماری توانایی کنترل بیشتری در مقابل. solani. r نسبت به جدایه وحشی داشتنه اند. افزایش تولید آنزیمهای تجزیه کننده دیواره سلولی از طریق القای موتاسیون با اشعه گاما می تواند منجر به افزایش پتانسیل آنتاگونیستی در اکثر جدایه ها شود و این موضوع تئوری مطالعه پروفایل پروتئینی این جدایه های جهش یافته را تقویت نموده است. با افزایش قدرت آنتاگونیستی علیه r. solani سایر جدایه های جهش یافته که میزان بالاتری از تولید آنزیم را نشان نداده اند احتمالا واجد جهش هایی در سایر مکانیسم های بیوکنترلی می باشند.

. در این پژوهش، جدایه مادری trichoderma viride با استفاده از دستگاه گاماسل باچشمه کبالت 60 (اکتیویته 2500 کوری و نرخ دز 23/0 گری در ثانیه) در محدوده دز 250 گری مورد پرتوتابی با اشعه گاما قرار گرفت و 26 جدایه جهش یافته از یک جدایه مادری (تیپ وحشی) انتخاب شدند. جهت بررسی خواص آنتاگونیستی جدایه های جهش یافته نسبت به جدایه مادری، این جدایه ها با آزمون های کشت متقابل، متابولیت های فرار و ترشحات مایع خارج سلولی نسبت به بیمار گر های fusarium graminearum schwabe، m. phaseolina، rhizoctonia solani kühn. (ag4) و sclerotinia sclerotiorum (lib.) de bary در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار مورد ارزیابی قرار گرفتند.به منظور بررسی اثر جدایه های آنتاگونیست بر رشد رویشی کنجد و جلوگیری از فعالیت بیماری-زایی m. phaseolina مورد ارزیابی قرار گرفتند. این آزمون در قالب طرح بلوک کامل تصادفی با 18 تیمار و چهار تکرار انجام پذیرفت.. به موازات مطالعات آزمایشگاهی و گلخانه ای، مطالعات مولکولی با استفاده از نشانگر های مولکولی (rep-pcr و rapd) برای ارزیابی تغییرات ژنتیکی جدایه های جهش یافته نسبت به جدایه مادری نیز صورت گرفت.

گونه های تریکودرما به تولید آنزیم های سلولازی با فعالیت آنزیمی نسبتاً بالا مشهورند. با این حال به علت عملکرد آنزیمی کم و هزینه بالای تولید، تلاش ها به منظور استفاده از آنزیم های سلولازی آنها در تبدیل زیستی پسماند های سلولزی چندان موفقیت آمیز نبوده است. از همین رو، تا کنون روش های متعددی در جهت ارتقای ظرفیت تولید سیستم های سلولازی در قارچ های جنس تریکودرما به کار گرفته شده است. تحقیق حاضر با هدف دستیابی به سویه های موتانتی با توان بیش تولید آنزیم سلولاز خارج سلولی در سه گونه از قارچ تریکودرما با استفاده از القای موتاسیون با پرتو گاما انجام گرفته است. سوسپانسیون اسپور spores/ml) 107) تهیه شده از هر یک از سه گونه قارچ تریکودرما شاملt.reesei ، t. virideو t. harzianum با استفاده از دستگاه گاماسل با چشمه کبالت 60 مستقر در مرکز تحقیقات کشاورزی، پزشکی و صنعتی هسته ای پژوهشگاه علوم و فنون هسته ای کرج، تحت پرتو تابی گاما در محدوده دز 250 گری به عنوان دز اپتیمم قرار گرفت. پس از پرتو تابی، اسپور های جوانه زده به محیط کشت pda منتقل و از بین آنها سویه های موتانت با قابلیت اسپور زایی بهتر، انتخاب و پنج بار واکشت شدند تا پایداری آنها مورد آزمون قرار گیرد. آزمایشات تخمیر در ارلن مایر های 500 میلی لیتری حاوی 50 میلی لیتر محیط کشت تخمیری (محیط تولید آنزیم) با استفاده از سلولز والسس به عنوان منبع کربنی القا کننده انجام گرفت. محیط های کشت مذکور پس از تلقیح با میسلیوم، به مدت 48 ساعت در دمای°c 28 و دور rpm 180 گرمخانه گذاری گردید. پس از جدا کردن مایع فوقانی محیط های کشت سویه های وحشی و موتانت از توده سلولی آنها به کمک سانتریفیوژ، این مایع برای تعیین غلظت پروتئین خارج سلولی و فعالیت سلولازی مورد سنجش قرار گرفت. غلظت پروتئین بر اساس روش بردفورد و با استفاده از بوین سرم آلبومین به عنوان استاندارد اندازه گیری گردید. فعالیت سلولازی با استفاده از سوبسترا های سلولزی کاغذ صافی واتمن شماره یک، کربوکسی متیل سلولز، آویسل، سلولز باکتریایی و سلولز والسس و بر اساس دستورالعمل iupac (اتحادیه بین المللی شیمی محض و کاربردی) مورد سنجش قرار گرفت و قند های احیا کننده آزاد شده به روش دی نیترو سالیسیلیک اسید و با استفاده از گلوکز به عنوان استاندارد اندازه گیری شد. کلیه آزمایشات در سه تکرار انجام گرفت. به منظور بررسی بیان ژن های سلولازی، پروفایل پروتئین های خارج سلولی سویه های موتانت توسط الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید به همراه سدیم دو دسیل سولفات (sds-page) مورد مطالعه قرار گرفت و با پروفایل مربوط به سویه های وحشی آنها مقایسه گردید. بر اساس نتایج حاصل از فعالیت آنزیمی، از میان پنج سوبسترای سلولزی مورد آزمون، بیشترین و کمترین فعالیت سلولازی، در حضور سلولز والسس و آویسل به دست آمد. نتایج به دست آمده از sds-page نیز نشان داد که موتاسیون القایی توسط پرتو گاما منجر به ایجاد تغییر در بیان ژن های سلولازی و پروفایل پروتئینی سویه های موتانت در مقایسه با سویه مادری آنها شده است. به طور کلی، یافته های این تحقیق نشان داد که پرتو تابی گاما قادر است عملکرد و ظرفیت هیدرولیز آنزیم های سلولازی قارچ های سلولولایتیک را به شکل قابل توجهی ارتقا دهد و می تواند به عنوان روشی ساده و کارآمد در برنامه های اصلاحی به منظور دستیابی به سویه های موتانت قارچی که توانایی تولید مقادیر بالای آنزیم و دیگر متابولیت های میکروبی را داشته باشند، به کار گرفته شود.

کاهش پیوسته ی منابع سوخت فسیلی و افزایش پیوسته ی بهای سوخت موجب تلاش های گسترده برای دست یابی به سوخت های جایگزین شده است. اگر بتوان با بهینه سازی هر چه بیشتر فرایندهای تولید، از سوخت های جایگزینی مانند اتانول استفاده کرد می توان امیدوار بود که مشکل انرژی تا اندازه ی زیادی حل شود. برای نیل به این هدف، موثرترین راهکار تجزیه سلولز با استفاده از کمپلکس سلولاز است.سلولز از زنجیره های بلند مولکول های گلوکز تشکیل شده که در فرآیند هیدرولیز، این زنجیره ها گسسته می شوند تا قند را آزاد کنند. سلولازها گستره ی وسیعی از کاربرد را در صنعت(تولید بیواتانول) و کشاورزی(مکمل خوراک دام) دارا می باشند. یکی از بزرگترین مشکلات و موانع استفاده ی تجاری و گسترده از آنزیم سلولاز، بهای آن است.یکی از راهکارهای عمدهبرای کاهش بهای آنزیم، تولید آنزیم های بهینه می باشد.میزان تولید آنزیمهای سلولازی در قارچ تریکودرما ریسئی زیاد بوده و برای اهداف تجاری نیز عمدتاً از آن استفاده شده است. در این پژوهش که با هدف افزایش فعالیت سلولاز در قارچ تریکودرما ریسئی با روش القای موتاسیون شیمیایی(با موتاژن ems)، و فیزیکی(اشعه گاما و فرابنفش) صورت گرفت، ارزیابی کیفی موتانت های حاصل توسط آزمون مندلز، و القای تولید آنزیم به منظور ارزیابی کمی در محیط های کشت اصلاح شده تریکودرما انجام شد. میزان تولید پروتئین و فعالیت ویژه ی آنزیم سلولاز در همه ی موتانت ها اندازه گیری و پروفایل پروتئینی با ژل sds-page بررسی شد. آنالیز نتایج این آزمایشات نشان داد که تیمار های جهش زایی شیمیایی(ems)، فیزیکی(اشعه گاما) و تلفیقی(اشعه گاما و ems) در افزایش تولید آنزیم سلولاز در قارچ تریکودرما موفقیت آمیز بوده و به ترتیب سه جدایه ی tr.c6، tr.m21، وdm7(21) انتخاب شد که میزان پروتئین و فعالیت سلولازی آنها نسبت به جدایه ی والدی افزایش یافته بود.

اطلاعات به دست آمده از 423 نفر پاسخگو نتایج زیر را نشان می دهد: طبق نتایج به دست آمده، ضریب همبستگی پیرسون برابر است با 759. با 99 درصد اطمینان و 1 درصد خطا، میان دو متغیر همبستگی وجود دارد و فرضیه تحقیق تایید می شود. به عبارت دیگر میان دو متغیر کارایی و وفاداری مشتری همبستگی معناداری وجود دارد. شدت این همبستگی قوی و جهت آن مثبت است. یعنی مشتریانی که کارایی بانک را بیشتر می دانند به بانک، وفاداری بیشتری دارند و برعکس. طبق نتایج به دست آمده، ضریب همبستگی پیرسون برابر است با 744. با 99 درصد اطمینان و 1 درصد خطا، میان دو متغیر همبستگی وجود دارد و فرضیه تحقیق تایید می شود. به عبارت دیگر میان دو متغیر اجرای نیازمندی ها و وفاداری مشتری همبستگی معنی داری وجود دارد و فرضیه تحقیق تایید می شود. شدت این همبستگی قوی و جهت آن مثبت است. یعنی مشتریانی که اجرای نیازمندی ها را در حد بالاتری می-دانند، وفاداری بیشتری به بانک دارند و برعکس. طبق نتایج به دست آمده، ضریب همبستگی پیرسون برابر است با 557. با 99 درصد اطمینان و 1 درصد خطا، همبستگی میان دو متغیر معنی دار است و فرضیه تحقیق تایید می شود. به عبارت دیگر میان دو متغیر قابلیت دستیابی و وفاداری مشتری همبستگی معناداری وجود دارد. شدت این همبستگی در حد متوسط و جهت آن مثبت است. یعنی مشتریانی که قابلیت دستیابی به سایت بانک را در سطح بالاتری ارزیابی کرده اند وفاداری بیشتری به بانک دارند و برعکس. طبق نتایج به دست آمده، ضریب همبستگی پیرسون برابر است با 673. با 99 درصد اطمینان و 1 درصد خطا، همبستگی میان دو متغیر معنی دار است و فرضیه تحقیق تایید می شود. به عبارت دیگر میان دو متغیر خصوصی بودن اطلاعات و وفاداری مشتری همبستگی معناداری وجود دارد. شدت این همبستگی متوسط و جهت آن مثبت است. یعنی مشتریانی که میزان محرمانه ماندن اطلاعات خود در سایت را بالاتر می دانند، وفاداری بیشتری دارند و برعکس. طبق نتایج به دست آمده، ضریب همبستگی پیرسون برابراست با 732. با 99 درصد اطمینان و 1 درصد خطا، همبستگی میان دو متغیر است و فرضیه تحقیق تایید می شود. به عبارت دیگر میان دو متغیر رضایت مشتری و وفاداری مشتری همبستگی معنی داری وجود دارد. شدت این همبستگی قوی و جهت آن مثبت است. یعنی مشتریانی که رضایت بیشتری از بانک پاسارگاد دارند، وفاداری بیشتری به این بانک دارند. طبق نتایج به دست آمده، ضریب همبستگی پیرسون برابراست با 801. با 99 درصد اطمینان و 1 درصد خطا، میان دو متغیر همبستگی وجود دارد. به عبارت دیگر میان دو متغیر کیفیت خدمات بانکداری اینترنتی و وفاداری مشتری همبستگی وجود دارد. شدت این همبستگی قوی و جهت آن مثبت است. یعنی هر چه کیفیت خدمات بانکداری اینترنتی بالاتر رود، وفاداری مشتریان به بانک نیز بالاتر می رود و بالعکس. طبق معادله رگرسیونی، موثرترین متغیر مستقل در این مدل، رضایت مشتری است. به طوری که با افزایش رضایت مشتری، وفاداری مشتری نیز افزایش می یابد و بالعکس. بعد از رضایت مشتری، اجرای نیازمندی ها قوی ترین متغیر مستقل است. همچنین کارایی در رتبه سوم قرار دارد.

تریکودرماریسی یکی از کارآمدترین میکروارگانیسم ها در تولید آنزیم سلولاز می باشد. هدف از این مطالعه دستیابی به موتانت برتر تریکودرماریسی از طریق ایجاد موتاسیون توسط پرتو های گاما می باشد. در این تحقیق برای افزایش پتانسیل تولید آنزیم سلولاز قارچ تریکو درماریسی ptcc 5142 اسپور قارچ با غلظت 1×106 spore/ml مورد تابش پرتو گاما با دوز 250 گری قرار گرفت. پس از انتخاب 21 جهش یافته از روش تخمیر، برای تولید آنزیم سلولاز استفاده گردید. برای سنجش آنزیم سلولاز و پکتیناز از آویسل ،کربوکسی متیل سلولوز ،کاغذ فیلتر شماره 1، سلوبیوز، ساکارز و پکتین استفاده گردید. برای تعیین وزن مولکولی آنزیم های سلولازی از روش sds-page استفاده گردید. بالاترین آنزیم سلولاز در جدایه یt.r m5 اندازه گیری گردید و به عنوان بهترین جدایه در ساکاریفیکاسیون تفاله چغندرقند برای دستیابی به سوخت زیستی انتخاب شد. سوخت زیستی توجهات زیادی را در حل بحران انرژی به خود جلب کرده است. در این تحقیق میزان الکل تولیدی توسط دو مخمر کلایورومایسس مارکسیانوس ( ptcc 5795) و ساکارومایسس سرویزیه مورد ارزیابی قرار گرفت. روش تخمیر غوطه ور برای تولید الکل و پروتئین تک سلولی مورد استفاده قرار گرفت. مخمر ساکارومایسس سرویزیه 6/19% بیواتانل و 4/12% پروتین در تیمار با t.r m5 تولید کرد که 56/1 برابر افزایش میزان تولید بیواتانل از خود نشان داد. کلایورومایسس مارکسیانوس 59/15% بیواتانل و 12/12% پروتئین، با تیمار t.r m5 و 45/11% بیواتانل و 4/16% پروتئین با تیمار تریکودرماریسی پس از گذشت 72 ساعت در دمای 35 درجه سانتیگراد با دور همزدن (rpm) 180 ، تولید کرد. ایجاد جهش با پرتو گاما بر روی t. reesei (ptcc 5142) سبب بهبود تولید سلولاز و پکتیناز و بیواتانل شده است.

به منظور القای جهش ژنتیکی در دو گونه t. viride و t.harzianum سوسپانسیون اسپور هر یک از آنها در معرض دزهای 0 تا 450 گری اشعه گاما در دستگاه گاما سل قرار گرفت. آزمون کشت متقابل نشان داد که، تمام جدایه¬های جهش یافته t. viride از لحاظ آماری (p>0.05) قدرت آنتاگونیستی بالاتری نسبت به جدایه مادری در مقابل fusarium solani دارند. تنها 20% از موتانت¬های t.harzianum قدرت آنتاگونیستی بالاتری نسبت به جدایه مادری داشتند (p>0.05). برای مطالعه اثرات اشعه گاما بر روی جدایه¬های جهش یافته گونه¬های تریکودرما استفاده شد. پنج آغازگر rapd (opa09 opa10, opa11, opa14, opa 16) انتخاب شدند. نتایج حاصل از مارکر rapd با استفاده از این آغازگرها در سطح تشابه 84% ، موتانت¬های t. viride را به ترتیب به 12، 16، 14، 20 و 19 گروه تقسیم کرد. بررسی ارتباط پروفیل rapd جدایه های جهش یافته از t.viride، با توانایی آنتاگونیستی آن ها علیه fusarium solani نشان داد که دندروگرام حاصل از جدایه ها و گروه بندی آنها بر اساس آنتاگونیستی علیه این بیمارگر موتانت های این گونه را به گروه های مختلفی تقسیم می کنند که منطبق نیستند. دندروگرام حاصل از پنج آغازگر از آغازگر های rapd با استفاده از روش upgma و ضریب تشابه jaccard در سطح تشابه 84 درصد جدایه ها را به سه گروه تقسیم کرد که در آن جدایه های جهش یافته 9th و 17th در یک گروه، بقیه جدایه های جهش یافته در گروه دیگر و جدایه مادری از هر دو گروه جهش یافته جدا می شود. بر اساس نتایج این نشانگرهای مولکولی مبتنی بر) pcr (rapd ، بین جدایه مادری و جدایه¬های جهش یافته تفاوت ژنومی وجود دارد و وجود تفاوت معنی دار از نظر خواص آنتاگونیستی ناشی از تفاوت ژنتیکی می باشد که در اثر القای جهش به وجود آمده است. به غیر از جدایه های 9 th و 17th بین جدایه¬های دیگر از نظر آنتاگونیستی تفاوت وجود داشت اما نشانگر مورد مطالعه نتوانست آن ها را از هم متمایز کند.

آنزیم پکتیناز در صنایع مهمی ازجمله صنعت کاغذ¬سازی و در کارخانجات تولید آبمیوه جهت شفاف-سازی آبمیوه و در خوراک دام و طیور کاربرد فراوانی دارد. یکی از مهمترین جدایه¬های قارچی از نظر تولید انواع آنزیم، گونههای تریکودرما می¬باشد. هدف از انجام این آزمایش ایجاد جهش توسط پرتو گاما در ژنوم قارچ تریکودرما رسئی و تریکودرما هارزیانوم جهت افزایش پتانسیل فعالیت آنزیم پکتیناز، آنزیم زایلاناز و انواع آنزیم¬های سلولاز بود. در این مطالعه القاء جهش در t. reesei و t. harzianum با دز بهینه 250 گری انجام شد و پس از آماده¬سازی سوبسترا و القاء آنزیم پکتیناز، زایلاناز و انواع آنزیم¬های سلولاز در جدایه¬های جهش ¬یافته، فعالیت آنزیمی 21 جدایه موتانت t. reesei و 20 جدایه موتانت t. harzianum حاصل از محیط تخمیر پکتین و پسلیوم ارزیابی گردید و بعد از انتخاب بهترین جدایه جهش ¬یافته از نظر فعالیت آنزیمی، میزان فعالیت آنزیمی جدایه موتانت برتر با سوبستراهای مختلف از جمله تفاله¬های لیمو، پرتقال، هویج، طبق آفتاب¬گردان، غلاف سبز باقلا، پوسته سویا و پوسته پسته اندازه¬گیری شد. نتایج نشان داد که در بین هشت گونه¬¬ی مختلف قارچ تریکودرما، قارچ تریکودرما هارزیانوم و در بین جدایه¬های جهش¬ یافته دو گونه مذکور، دو جدایه جهش ¬یافته m 9 t.r و 7 t.hm از نظر میزان فعالیت آنزیمی و بررسی غلظت پروتئینی فعال¬ترین جدایه¬ها بودند (05/0p<). از آنجایی که t.hm7 از نظر فعالیت آنزیم نسبت به بقیه جهش ¬یافته¬ها فعال¬تر بود به عنوان میکروارگانیسم جهت بررسی فعالیت آنزیمی با سوبستراهای مختلف انتخاب شد. از بین سوبستراهای مورد استفاده، پوسته پسته از نظر میزان فعالیت زایلاناز، سلوبیاز، کربوکسی متیل سلولاز و آویسلازو طبق آفتابگردان از نظر فعالیت آنزیم پکتیناز به ترتیب 6.76، 6.76، 11.71 ، 6.18 و 1.60 واحد در میلی¬لیتر اندازه¬گیری شد. نتایج نشان داد که تولید آنزیم¬های هیدرولیتیک از سوبسترای ارزان قیمتی نظیر ضایعات کشاورزی با استفاده از جهش یافته¬های قارچ تریکودرما، برای تولید آنزیم¬های قابل استفاده در صنعت مقدور است.

بیماری بلایت فوزاریومی سنبله گندم که به وسیله قارچ fusarium graminearum ایجاد می شود, قادر است علاوه بر کاهش چشمگیر عملکرد, خسارت غیر مستقیمی را نیز از طریق تجمع مایکوتوکسین ها (تریکوتسین ها) در دانه های برداشت شده وارد سازد که محصول را برای تغذیه انسان و دام نامناسب می نماید. تریکوتسین ها (مانند don) ممانعت کنندگان سنتز پروتئین در یوکاریوت ها می باشند و ژن tri101 که یک 3- o- استیل ترانس فراز است به عنوان یکی از مکانیسم مقاومت مطرح می باشد. مطالعات گذشته نشان داده اند که بیان tri101 منجر به سرکوب حساسیت به don در گیاهان تراریخت شده است. ayt1 ژن همولوگ tri101 است که توانایی 3- o- استیلاسیون تریکوتسین ها را داراست و می تواند don را به فرم استیله که از سمیت پایین تری برخوردار است تبدیل کند. هدف اصلی این پژوهش ارزیابی مقاومت گیاه مدل توتون تراریخت با ayt1 به داکسی نیوالنول است. برای بررسی بیان تراژن مذکور, اپی توپ cmyc به ژن ayt1 افزوده شده و با استفاده از اگروباکتریوم به گیاه توتون انتقال داده شد. پس از تایید تراریختی گیاهان با سازه ژنی ayt1-cmyc با استفاده از آنالیزهای مولکولی, بررسی های ایمنوبلاتینگ و سرولوژیک در سطح پروتئین و همچنین فعالیت استیل ترانس فرازی بر روی تریکوتسین ها انجام شد. بیان و فعالیت ayt1 در پنج لاین تراریخت مشاهده شد. مکانیسم دیگری که در جهت کاهش تاثیرات don شناسایی شده, دست ورزی پروتئین هدف (rpl3) می باشد. در این پژوهش دو تغییر نقطه ای(اسید آمینه شماره 258 از تریپتوفان به سیستئین و شماره 259 از هیستیدین به تیروزین) در توالی cdna ژن rpl3 گوجه فرنگی با استفاده از تکنیک جهش زایی با جایگاه مشخص (sdm) انچام پذیرفت. گیاه مدل توتون تراریخت با اینlerpl3 cdnaی دست ورزی شده از نظر توانایی باززایی و تولید کالوس در حضور توکسین don مورد آزمایش قرار گرفت. تفاوتهای قابل توجهی از نظر توانایی تولید کالوس و باززایی در حضور donدر لاینهای تراریخت در مقایسه با شاهد غیرتراریخت مشاهده گردید. در بین جهش ها همانطور که انتظار می رفت مقاومت به donدر گیاهان حاوی جهش دوگانه بیش از سایرین بوده و در مقایسه بین جهش های منفرد, گیاهان حاوی lerpl3h259y پاسخ مقاومت بهتری از خود نشان دادند. این نتایج نشان می دهد که بیان پروتئین rpl3 دست ورزی شده می تواند در افزایش تحمل به don (و به دنبال آن مقاومت به fhb) موثر باشد.