کلونینگ و بررسی بیان ژن کدکننده کاتپسین L کنه ریپیسفالوس آنولاتوس
Authors
Abstract:
زمینۀ مطالعه: کنه‌ها از مهم‌ترین انگل‌های خارجی می‌باشند که باعث ایجاد زیان اقتصادی فراوانی در صنعت دامپروری می‌شوند. لذا تلاش در جهت حذف یا کاهش آن‌ها بر روی دام‌ها بسیار ضروری می‌باشد. سیستئین پروتئازها از جمله ترکیباتی هستند که نقش مهمی را در اعمال فیزیولوژیک کنه‌ها بر عهده دارند و کاندید مناسبی برای دست یابی به واکسن ضد کنه می‌باشند. کاتپسین‌ها یکی از مهم‌ترین سیستئین پروتئازها می‌باشند. هدف: هدف از این مطالعه، کلونینگ و بیان قطعه ژنی کاتپسین L کنه ریپیسفالوس آنولاتوس به‌منظور بررسی ایمنوژنیسیتی آن بوده است. روش‌کار: پس از جمع‌آوری کنه‌ها و تشخیص جنس و گونه آن‌ها اقدام به کشت کنه‌ها گردید. سپس استخراج RNA از نوزاد کنه‌ها، سنتز cDNA با استفاده از پرایمر اختصاصی کاتپسین و تکثیر آن با روش RT-PCR انجام پذیرفت. قطعه ژنی موردنظر در پلاسمید بیانی pQE30 کلون شد. در ادامه توالی کوتاه‌تری از ژن کاتپسین (654 جفت باز) نیز بصورت پلاسمید صناعی تهیه گردید. بیان پروتئین حاصل از هر دو پلاسمید نوترکیب در سیستم بیان پروکاریوتی E.ColiBL21 انجام و ایمنی‌زایی پروتئین‌های نوترکیب حاصل از آن با روش‌های سرولوژیک دات بلات و وسترن بلات در مواجهه با سرم خرگوش‌های چالش‌یافته با این پروتئینها و گوساله‌های آلوده به کنه مورد بررسی و مقایسه قرار گرفت. نتایج: نتایج مطالعه حاضر نشان داد پروتئین حاصل از پلاسمید نوترکیب صناعی به دلیل حلالیت بیشتر بیان و تخلیص بالاتری داشت. همچنین سرم خرگوش چالش‌یافته با این پروتئینها، قابلیت شناسایی هر دو پروتئین نوترکیب را داشت. اما شدت واکنش سرم گوساله‌های آلوده به کنه با پروتئین‌های نوترکیب تولید شده کمتر بود. نتیجه‌گیری نهایی: هر چند شدت واکنش سرم گوساله‌های آلوده به کنه با پروتئین‌های نوترکیب در مقایسه با سرم خرگوش کمتر بود، اما این امر با توجه به پنهان بودن آنتی‌ژن کاتپسین در روده کنه دور از ذهن نبود. در مجموع پروتئین نوترکیب کاتپسین ال می‌تواند به عنوان یک گزینه مناسب در جهت ایمن‌سازی گوساله علیه آلودگی به کنه ریپی سفالوس آنولاتوس به کار رود، هر چند بررسی‌های بیشتر در این زمینه ضروری به نظر می‌رسد.
similar resources
کلونینگ ژن کدکننده آنتی‌ژن سطحی ویروس هپاتیت B در اشرشیاکولی
Background & Aim: Hepatitis B virus(HBV) infection is endemic worldwide. It is estimated every year more than 350 million people become infected with HBV(new cases) worldwide. Unfortunately, there are no satisfactory drugs to cure HBV and related diseases and the only way to control it is through vaccination. Measurements of HBV DNA levels are routinely used to identify infectious chronic c...
full textبررسی ایمونوپروتئومیکس عصاره نوزاد کنه بوافیلوس آنولاتوس
مقدمه و هدف: کنه بوافیلوس آنولاتوس، یک کنه تک میزبانه مهم در شرایط آب و هوایی مدیترانه ای و همچنین ایران می باشد. امروزه استفاده از پروتئین های کنه ای، یک استراتژی مناسب جهت کنترل و پیش گیری در مقابل آلودگی های کنه ای می باشد. این مطالعه بمنظور شناسایی پروتئین های ایمونوژن لارو کنه بوافیلوس آنولاتوس با استفاده از روش الکتروفورز یک و دو بعدی انجام پذیرفته است. مواد و روش کار: پس از جمع آور...
full textکلونینگ و بررسی بیان ژن hcpD هلیکوباکتر پیلوری
زمینه و هدف: ژن hcpD به عنوان یکی از ژن های کد کننده خانواده پروتئین های غنی از سیستئین هلیکوباکتر پیلوری است. این دسته از پروتئینها سبب تحریک سیستم ایمنی میزبان و تولید آنتی بادی میگردند. هلیکوباکتر پیلوری مستقر در معده انسان سبب بیماریهای گوارشی نظیر: زخم دوازدهه، گاستریت مزمن و سرطان معده میشود. هدف از این مطالعه، تکثیر، جداسازی و همسانه سازی ژن hcpD هلیکوباکتر پیلوری در وکتور pcDNA3.1(-) و ...
full textکلونینگ و بیان ژن hly Listeria monocytogenes در Lactococcus lactis
ژن hly یکی از مهم‌ترین عوامل ویرولانس Listeria monocytogenes می‌باشد که پروتئین لیستریولیزین (O (LLO را رمزگذاری می‌کند. LLO یک پروتئین ایمونوژن با قابلیت بالاست، که قادر به برانگیختن ایمنی سلولی و هومورال است و علاوه بر فعالیت همولیتیک، عملکردهای متعدد دیگری نیز دارد. این پروتئین با تخریب فاگولیزوزوم به فرار باکتری از سیتوپلاسم، زنده ماندن و رشد درون سلولیL. monocytogenes کمک می کند.از طرفی La...
full textکلونینگ و بیان ژن MOMP217 کلامیدیا تراکوماتیس در اشرشیا کولی
Background: Chlamydia trachomatis is a silent, turbulent and unfortunately neglected bacterium which impairs human genital tract function. This Gram-negative obligate intracellular bacterium with unique life cycle and immunopathogenesis result in serious complications, such as Endometritis, pelvic inflammatory disease (PID), infertility, ability to ease HIV transmission and cofactor in human ...
full textMy Resources
Journal title
volume 75 issue 2
pages 136- 146
publication date 2020-06-21
By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.
Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023