کلون‌کردن اپیتوپ‌های خطی آنتی‌ژن Eg95 اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pEGFP وبررسی بیان آن در سلول CHO

Authors

  • رقیه مصری
  • سمیه محمدی
  • سید عبدالحمید انگجی
  • محمد طهماسب
  • مژگان احمدزاده
Abstract:

زمینه و هدف: کیست هیداتیک، بیماریی است که ازطریق تخم انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس دفع‌شده از مدفوع سگ آلوده به انسان و دام منتقل‌می‌شود. این انگل، یکی از کرم‌های نواری خانواده‌ی Taeniidae می‌باشد که باعث ایجاد مشکلات بهداشتی گسترده در انسان و خسارت‌های اقتصادی به صنعت دامپروری می‌شود. بدین منظور، طراحی واکسن به‌منظور پیشگیری ازبروز این بیماری حائز اهمیت می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این تحقیق، توالی‌های کدکننده‌ی اپیتوپ خطی تحریک‌کننده‌ی سلول‌های T، سنتز و در محل برش XhoI در وکتور pEGFP-N1 کلون‌شد. وکتورهای نوترکیب توسط شوک الکتریکی به سلول‌های CHO ترانسفورم‌شدند و بیان پروتئین مورد نظر به‌صورت فیوژن با پروتئین سبز فلورسنت توسط میکروسکوپ فلورسنت مورد بررسی قرارگرفت. یافته‌ها: صحت کلونینگ باروش PCRمستقیم بر روی کلونی و درنهایت با روش توالی یابی تایید گردید. بیان پپتید فیوژن با GFP توسط میکروسکوپ فلورسنت مورد بررسی قرارگرفت. نتیجه‌گیری: نتایج این تحقیق نشان‌می‌دهد که اپیتوپ‌های خطی آنتی‌ژن Eg95کلون‌شده در وکتور pEGFP و در سلول CHO بیان-گردیده‌است. در ادامه می‌بایست این سازه DNA به حیوان مدل (موش) تزریق‌شده و پاسخ ایمنی حیوان مورد بررسی قرارگیرد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

کلون کردن اپیتوپ های خطی آنتی ژن eg95 اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pegfp وبررسی بیان آن در سلول cho

زمینه و هدف: کیست هیداتیک، بیماریی است که ازطریق تخم انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس دفع شده از مدفوع سگ آلوده به انسان و دام منتقل می شود. این انگل، یکی از کرم های نواری خانواده ی taeniidae می باشد که باعث ایجاد مشکلات بهداشتی گسترده در انسان و خسارت های اقتصادی به صنعت دامپروری می شود. بدین منظور، طراحی واکسن به منظور پیشگیری ازبروز این بیماری حائز اهمیت می باشد. مواد و روش ها: در این تحقیق، توال...

full text

شناسایی وکلون کردن اپی توپ های خطی آنتی ژن p14-3-3 انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pegfp-n1 و بررسی بیان آن در سلول های cho

در این پروژه به منظور طراحی و ساخت یک dna واکسن موثر علیه کیست هیداتیک با حداقل ساختار ممکن و حداکثر قدرت تحریک ایمنی از توالی کدکننده اپی توپ های خطی آنتی ژن p14-3-3 که ایمونوژن تر می باشد و در اکثر مراحل زندگی انگل و سروتیپ های متعدد با ساختار حفاظت شده وجود داشته و واکسن نوترکیب آن نیز پاسخ ایمنی چشمگیری را علیه کیست هیداتیک نشان داده، جهت کلونینگ در وکتور بیانی pegfp-n1 به جای توالی کدکننده...

کلون کردن اپی توپ های خطی تحریک کننده ی لنفوسیت T آنتی ژن EG95 اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pGEX4t1 و بررسی بیان آن با روش SDS-PAGE

زمینه و هدف: انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس عامل بیماری مشترک بین انسان و دام به نام کیست هیداتیک یا هیداتیدوزیس است؛ موفق­ترین واکسن نوترکیب علیه این بیماری از کلون کردن ژن کد کننده آنتی­ژن 25 کیلو دالتونی آن یعنی EG95 در وکتور pGEX می­باشد که ایمنی سلولی و همورال قابل‌توجهی را در گوسفندان ایجاد کرده است اما با توجه به نقش ایمنی سلولی TH1 در غلبه بر این بیماری و نقش اپی­توپ­های خطی در تحریک این نو...

full text

کلون کردن اپیتوپ‌های خطی آنتی ژن P14-3-3 در وکتور pEGFP-N1 به عنوان یک مدل واکسن DNAجهت القا ایمنی علیه کیست هیداتیک و بررسی بیان آن در رده سلولی CHO

زمینه و هدف: کیست هیداتیک در اثر آلودگی با لارو انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس ایجاد می­شود. در مرحله لاروی این انگل آنتی­ژن­های متعددی تولید می­شود که یکی از این آنتی­ژن­ها، آنتی­ژنی از خانواده پروتئین­های p14-3-3 می­باشد و واکسن نوترکیب آن ایمنی‌زایی قابل توجهی را در موش القا کرده است. با توجه به ایمونوژن­تر بودن نواحی اپی­توپی آنتی­ژن­ها و تولید پاسخ ایمنی  Th1 مطلوب هدف از این مطالعه کلون کردن ...

full text

کلون کردن اپی توپ های خطی پیش بینی شده آنتی ژن تروپومیوزین اکینوکوکوس گرانولوزوس برای لنفوسیت های t در وکتور pegfp-n1 و بررسی بیان آن در رده ی سلولی cho

اکینوکوکوس گرانولوزوس انگلی است که آلودگی با مرحله لاروی آن سبب ایجاد بیماری هیداتیدوزیس در انسان و نشخوارکنندگان می شود؛ تاکنون نزدیک به ده ژنوتیپ از این انگل شناسایی شده است. کشور ایران جزء مناطق با شیوع بالا است، بر این اساس مقابله با این انگل از لحاظ بهداشت جامعه اهمیت خاصی دارد. آنتی ژن های متفاوتی در مراحل مختلف زندگی این انگل بیان می شود، که یکی از آنها تروپومیوزین است. مطالعات پیشین نشا...

شناسایی و کلون کردن ژن کد کننده پروتئین EG95 ایزوله ایرانی اکینوکوکوس گرانولوزوس

سابقه و هدف: اکینوکوکوس گرانولوزوس (Echinococcus granulosus) سستود انگلی بوده که باعث ایجاد بیماری کیست هیداتید در انسان می شود. ژن کد کننده پروتئین EG95 می تواند به عنوان یک هدف مناسب جهت ساخت واکسن DNA برای پیشگیری از این بیماری باشد. با توجه به اهمیت این ژن و عدم وجود گزارشی مبنی بر مطالعه بر روی این ژن در ایران، هدف از این مطالعه شناسایی و کلون کردن ژن کد کننده پروتئین EG95 ایزوله ایرانی اک...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 22  issue 1

pages  66- 72

publication date 2015-04-04

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023