زیر همسانه سازی و بیان ژن SO9 گیاه غاسول صابونی در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری

Authors

  • امیرحسین برقی دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی گیاهی، مرکز علوم و تکنولوژی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران
  • حسین هنری دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی گیاهی، مرکز علوم و تکنولوژی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران
  • سید مجتبی آقایی دانشجوی دکتری باکتری‌شناسی، مرکز علم و فناوری زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران
  • محمدعلی ابراهیمی دانشیار علوم کشاورزی، مرکز علوم و تکنولوژی، دانشگاه پیام نو، تهران، ایران
Abstract:

: غاسول صابونی دارای ایزوفرم های مختلف پروتئین ساپورین می باشد. ساپورین جزء پروتئین های غیر فعال کننده ریبوزومی (RIPs) است. ایزوفرم SO9 ساپورین ها، آدنین 4324 موجود در توالی حفاظت شده GAGA را دپورینه کرده و باعث اختلال در پروتئین سازی می‌گردد. در این مطالعه بیان ایزوفرم SO9 در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری انجام شد. روش بررسی: ژن SO9 سنتز شده، از پلاسمید pUC57-SO9 نوترکیب توسط آنزیم های محدود کننده BamH1 و Sal1 جدا و در وکتور بیانی pET28a(+) زیر همسانه سازی شد. بیان پروتئین نوترکیب با IPTG القا گردید. پروتئین SO9 نوترکیب به وسیله کروماتوگرافی تمایلی نیکل خالص سازی شد. برای تایید پروتئین نوترکیب از تکنیک Western blotting استفاده شد. واکسیناسیون موش های سوری با پروتئین تخلیص شده به صورت صفاقی انجام و تیتر IgG سرم به وسیله ELISA بررسی شد.نتایج: زیر همسانه سازی ژن SO9 در وکتور بیانی pET28a(+) به وسیله واکنش PCR و هضم آنزیمی تایید شد. حضور باند پروتئینی 29 کیلودالتون در SDS-PAGE، بیان بالای پروتئین نوترکیب را نشان داد. پروتئین نوترکیب SO9 به وسیله آنتی بادی پلی کلونال شناسایی شد. بعد از تزریق پروتئین در گروه های تست نسبت به گروه های کنترل، میزان تیتر آنتی بادی تولید شده به وسیله تست ELISA اندازه گیری شد.نتیجه گیری: خاصیت ادجوانتی و ایمنوژنی آنتی ژن SO9 نوترکیب تخلیص شده سبب می‌شود که از این آنتی بادی برای شناسایی میزان حضور SO9 در گیاه غاسول صابونی، به عنوان کاندید واکسن، تهیه کیت تشخیصی و در مطالعات ضد سرطانی سلول های انسانی استفاده گردد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

همسانه سازی و بیان ژن مولد پپتید AcAMP از قارچ Aspergillus clavatus در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری

Background: Antimicrobial peptides have been considered as the key to change in the current antibiotics. AcAMP, Antimicrobial peptide is one of them, which has been purified from the Aspergillus clavatus ES1 fungus, and its biochemical properties and characterization indicate that this peptide has unique properties. The aim of this study was to express the gene of AcAMP peptide in Escherichia c...

full text

زیرهمسانه‌سازی و بیان ژن SO6 گیاه غاسول صابونی در باکتری E.coli و بررسی تیترآنتی‌بادی آن در رَت آزمایشگاهی

Introduction: Plant ribosome inactivating proteins act as N-glycosidase enzyme and produce by several family of Caryophyllaceae such as Saponaria Officinalis. Different Isoforms of RIPs expressed by Saponaria Officinalis. SO6 isoform depurinate Adenine 4324 in the conserved GAGA loop of 28SrRNA and disrupts protein synthesis. The aim of this study was expression of SO6 isoform in E.coli and inv...

full text

همسانه سازی و بیان آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس در باکتری e. coli

زمینه و هدف: سیاه­زخم یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل این بیماری باکتری باسیلوس آنتراسیس می­باشد. آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس برای درمان و واکسن قابل استفاده می باشد. هدف این مطالعه بیان آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس در باکتریe. coli می­باشد.  مواد و روش ها:  قطعات ژنی مورد نظر از پلاسمید pxoi  تکثیر و  با عمل soeiong pcr  قطعه بدست آمده در کلونینگ وکتور ...

full text

بیان کاست ژنی blf1-stxB در باکتری E. coli و بررسی تیترآنتی بادی در موش

Background and Objectives: One of the ways to strengthen the effect of vaccines is using the adjuvant. STxB has a carrier and adjuvant role that we can fuse it with vaccine candidate antigens and produce efficient vaccines. BLF1 has a role in the pathogenesis and infection by Burkholderia pseudomallei, that can be studied when fused with stxB.The aim of this study expression blf1-stxB gene Cass...

full text

همسانه سازی و بیان آنتی‌ژن حفاظتی تغییر‌یافته باسیلوس‌آنتراسیس در باکتری E. coli

زمینه و هدف: سیاه­زخم یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل این بیماری باکتری باسیلوس آنتراسیس می­باشد. آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس برای درمان و واکسن قابل استفاده می باشد. هدف این مطالعه بیان آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس در باکتریE. coli می­باشد.  مواد و روش ها:  قطعات ژنی مورد نظر از پلاسمید pXOI  تکثیر و  با عمل SOEiong PCR  قطعه بدست آمده در کلونینگ وکتور ...

full text

زیرهمسانه‌سازی و بیان ژن ممزوجی M‌L1-stxB دارواش در E. Coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری

زمینه و هدف: عصاره برگ‌های دارواش (Viscum album L) دارای پروتئین MLI از نوع RIP2 (پروتئین‌های غیرفعال ریبوزومی تیپ 2) با خواص لکتینی هستند. STxB شیگا توکسین به‌عنوان یک ایمونواجوانت و حامل، مطرح بوده و به گیرنده سطح سلولی خود به‌نام Gb3 متصل می‌گردد که روی اکثر سلول‌های بدن بیان می‌شود. در این مطالعه، بیان آنتی‌ژنML1-stxB  در E. coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری بررسی گردید. روش بررسی: در ا...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 27  issue 1

pages  103- 112

publication date 2020-04-20

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023