توسعه روش NASBA-ELISA برای تشخیص HIV-1 RNA

Authors

  • شهرابی, مریم
  • صباحی, فرزانه
  • پریان, مهدی
Abstract:

  چکید ه   سابقه و هدف   با شروع عفونت HIV-1 ، اولین مارکری که در خون آشکار می‌شود، RNA ویروسی می‌باشد. از میان روش‌های موجود که شناسایی RNA را هدف قرار می‌دهند؛ متداول‌ترین روش‌ها NASBA و RT-PCR هستند. NASBA مزیت‌های متعددی نسبت به RT-PCR ارایه می‌کند. در این پژوهش، واکنش NASBA در ترکیب با روش آشکارسازی آسان و حساس الایزا، برای تشخیص و آشکارسازی HIV-1 RNA مورد استفاده قرار گرفت.   مواد و روش‌ها   نوع مطالعه انجام شده از نوع بنیادی ـ کاربردی بود. با وارد کردن نوکلئوتید 11-dig-UTP در مخلوط واکنش NASBA ، RNA نشاندار تولید شد. آن‌گاه محصولات نشاندار NASBA در فاز مایع به یک پروب اختصاصی متصل به بیوتین هیبرید شدند. سپس هیبریدهای حاصل به یک پلیت پوشیده شده با استرپتواویدین منتقل شده، پس از اعمال شستشوها و خارج کردن محصولات غیر اختصاصی از محیط واکنش، آشکارسازی نهایی با اضافه کردن کونژوگه آنتی دیگوکسی ژنین ـ آنزیم و سوبسترای آن صورت گرفت.   یافته‌ها   نتایج به دست آمده نشانگر کارآیی واکنش NASBA در تکثیر ناحیه مورد نظر از ژنوم ویروس بود و آشکارسازی محصولات NASBA بر روی ژل آگاروز منحصراً یک باند 176 نوکلئوتیدی مربوط به هدف را نشان می‌داد. با به کارگیری روش الایزا در آشکارسازی محصولات NASBA ، برای غلظت 01/0 مایکرو مولار پروب، OD برابر با 11/0 ± 049/1 به دست آمد.   نتیجه گیری   در این مطالعه با به کارگیری آغازگر و پروب مناسب، روش تشخیصی NASBA-ELISA با حساسیت و اختصاصیت بالا برای HIV-1 راه‌اندازی شد.  

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

توسعه روش nasba-elisa برای تشخیص hiv-۱ rna

چکید ه   سابقه و هدف   با شروع عفونت hiv-1 ، اولین مارکری که در خون آشکار می شود، rna ویروسی می باشد. از میان روش های موجود که شناسایی rna را هدف قرار می دهند؛ متداول ترین روش ها nasba و rt-pcr هستند. nasba مزیت های متعددی نسبت به rt-pcr ارایه می کند. در این پژوهش، واکنش nasba در ترکیب با روش آشکارسازی آسان و حساس الایزا، برای تشخیص و آشکارسازی hiv-1 rna مورد استفاده قرار گرفت.   مواد و روش ها ...

full text

طراحی و توسعه تکنیک nasba-elisa برای تشخیص عفونت ویروس نقص ایمنی انسان در خون

چکیده طی دو دهه اخیر روشهای تشخیص hiv نقش مهمی را در حفظ سلامت در جهان ایفا کرده اند. روشهای مولکولی با حساسیت بالا نیز که اخیرا توسعه یافته اند قادرند عفونت را در مراحل بسیار ابتدایی نیز تشخیص دهند ؛ اما بسیاری از این تکنولوژی ها در کشور های در حال توسعه به دلایل اقتصادی قابل اجرا نیستند ؛ ولی چنانچه از هزینه های مربوط به این روشها کاسته شود استفاده از انها میسر می شود . با شروع عفونت hiv-...

15 صفحه اول

روش Multiplex RT-PCR در تشخیص عفونت همزمان ویروس‌های HIV-1 و HCV در نمونه‌های پلاسما

زمینه و هدف : از جمله مهم‌ترین عوامل عفونی منتقل شونده از طریق خون، ویروس‌هایHIV-1 و HCV می‌باشند. به‌خصوص در حالت عفونت همزمان که از مشکلات بالینی قابل توجه در بیماران مصرف کننده فراورده‌های خونی است. این مطالعه به منظور توسعه روش Multiplex RT-PCR در تشخیص عفونت همزمان ویروس‌های HIV-1 و HCV در نمونه‌های پلاسما انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه توصیفی به تشخیص همزمان ژنوم دو ویروس HIV-1 و ...

full text

طراحی و به کارگیری روش rt-pcr elisa multiplex برای تشخیص عفونت همزمان hcv و hiv-۱

هدف: علیرغم غربالگری خون های اهدایی با روش های حساس مبتنی بر شناسایی آنتی بادی، همچنان خطر انتقال عفونت های ویروسی وجود دارد. بنابراین طراحی روش های حساس مبتنی بر شناسایی اسید نوکلئیک مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این تحقیق طراحی روشی حساس تر در مرحله شناسایی نسبت به روش های معمول و همچنین تشخیص همزمان عفونت های ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک و ویروس هپاتیت c در یک نمونه است. مواد و روش ها: ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 8  issue 1

pages  42- 51

publication date 2011-03

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023