تعیین توالی و بررسی خصوصیات مولکولی ژن بتا 1 و 4 اندوگلوکاناز سویه Bacillus subtilis B5d

این پژوهش به منظور تعیین برخی ویژگی‌های کاتالیتیکی و خصوصیات مولکولی ژن کدکننده آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در سویهBacillus subtilis B5d  انجام شد. ژن کدکننده این آنزیم در سویه  B5d توسط آغازگرهای اختصاصی تکثیر، تعیین توالی و در پایگاه اطلاعاتی NCBI ثبت شد. تجزیه توالی حاصله و رسم درخت فیلوژنی با استفاده از نرم‌افزار Vector NTI و Mega.4 انجام شد. براساس نتایج حاصله قطعه تعیین توالی­شده شامل 794 نوکلئوتید بود که یک رشته پپتیدی با 264 اسیدآمینه را کد می‌کند. تجزیه توالی آمینواسیدی این ژن در سویه مورد بررسی نشان­داد که آنزیم اندوبتاگلوکاناز تولید­شده توسط سویه مورد پژوهش چندبخشی بوده که قسمت باند شونده به سلولز (Cellulose Binding Domain, CBD) آن مربوط‌به خانواده گلیکوزیدهیدرولاز 3 و قسمت کاتالیک (CD) آنزیم مورد بررسی متعلق به خانواده گلیکوزیدهیدرولاز 5 است. همچنین فعالیت آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز تولید شده توسط سویه‌ B5d، در محدوده دمایی 70-30 درجه سانتی‌گراد و pH 6/4 مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان‌داد که بیشترین فعالیت کاتالیتیک آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در دمای 55 درجه سانتی‌گراد بوده که U/L 83/461 برآورد شد. بررسی پایداری آنزیم در شرایط دمایی و pH‌های مختلف نشان‌داد که تا دمای 60 درجه سانتی‌گراد و در محدوده pH 10-5 آنزیم پایداری بهتری دارد