بیان زیر واحد S100A8 نوترکیب و اثر کلسیم بر ساختار سوم آن

Authors

  • غیبی, نعمت الله
  • نعمتی نیکو, فاطمه
Abstract:

  زمینه: S100A8 به عنوان یکی از زیر واحدهای سازنده هترودایمر کالپروتکتین در بسیاری از فرآیندهای وابسته به التهاب و سرطان ایفای نقش می­کند.   هدف: مطالعه به منظور تولید S100A8 به صورت نوترکیب و تعیین اثر کلسیم بر ساختار سوم آن انجام شد.   مواد و روش­ها: این مطالعه تجربی در سال 1392 در دانشگاه علوم پزشکی قزوین انجام شد. ابتدا زیر واحد S100A8 در پلاسمید pET15b نوترکیب و میزبان E. Coli BL21 (DE3) به صورت پروتئین دارای his-tag بیان شد. فرآیند تخلیص پروتئین در دو حالت محلول و نامحلول، با استفاده از ستون نیکل و غلظت­های مختلف ایمیدازول انجام شد. بیان و خلوص پروتئین نوترکیب از طریق الکتروفورز SDS-PAGE ارزیابی شد. ساختار سوم S100A8 با استفاده از روش طیف سنجی فلورسانس، در حضور و عدم حضور کلسیم بررسی گردید.   یافته­ها: در حالت نامحلول بیش­ترین پروتئین S100A8 با وزن مولکولی 8 کیلودالتون بیان شد. در فرآیند تخلیص، خالص­ترین پروتئین محلول با استفاده از غلظت­های 150 و 200 میلی­مولار ایمیدازول به دست آمد. در طول موج 330 نانومتر، بیش­ترین میزان نشر فلورسانس S100A8 در حضور و عدم حضور کلسیم مشاهده شد و شدت نشر در حضور غلظت­های مختلف کلسیم کاهش یافت.   نتیجه­گیری: تغییر ساختار سوم زیرواحد S100A8 در حضور کلسیم، ممکن است عملکرد پروتئین را تحت تأثیر قرار داده و به درک نقش این پروتئین در فرآیندهای التهابی و سرطان کمک نماید.     

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بیان زیر واحد s۱۰۰a۸ نوترکیب و اثر کلسیم بر ساختار سوم آن

زمینه: s100a8 به عنوان یکی از زیر واحدهای سازنده هترودایمر کالپروتکتین در بسیاری از فرآیندهای وابسته به التهاب و سرطان ایفای نقش می­کند.   هدف: مطالعه به منظور تولید s100a8 به صورت نوترکیب و تعیین اثر کلسیم بر ساختار سوم آن انجام شد.   مواد و روش­ها: این مطالعه تجربی در سال 1392 در دانشگاه علوم پزشکی قزوین انجام شد. ابتدا زیر واحد s100a8 در پلاسمید pet15b نوترکیب و میزبان e. coli bl21 (de3) به ...

full text

بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای S100 A8 , S100 A9 کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها

  زمینه و هدف: کالپروتکتین، S100 A8 و S100 A9 در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان S100 A8 و S100 A9 بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید.   روش کار: در این مطالعه تجربی از pET15b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای S100 A8, S100 A9 انسانی و از ( E.coli BL21 (DE3  به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از...

full text

بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای s۱۰۰ a۸ , s۱۰۰ a۹ کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها

زمینه و هدف: کالپروتکتین، s100 a8 و s100 a9 در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان s100 a8 و s100 a9 بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید.   روش کار: در این مطالعه تجربی از pet15b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای s100 a8, s100 a9 انسانی و از ( e.coli bl21 (de3  به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از ط...

full text

تخلیص پروتئین نوترکیب زیر واحد بتای انتروتوکسین ویبریو کلرا

زمینه و هدف: زیر واحد بتای انتروتوکسین ویبریو کلرا بخش غیرسمی و پنتامریک محسوب می‎شود که این بخش مسئول اتصال هولوتوکسین به گیرنده گانگلیوزید gm1 واقع در سلول‎های هسته‎دار است. در این بررسی سعی شد زیر واحد بتای توکیسن ویبریوکلرا در سیستم پروکاریوتی تولید، تخلیص و تأیید گردد. مواد و روش‎ها: در این مطالعه تجربی ابتدا حامل نوترکیب زیر واحد بتای توکسین ویبریوکلرا pet-28a قابل القاء در داخل سویه بیان...

full text

بیان نوترکیب فاکتور رشد اپیدرم انسانی در باکتری E. coli و ارزیابی اثر آن بر دودمان سلولی NIH-3T3

خانواده EGF شامل 13 عضو می باشد و فاکتور رشد اپیدرم انسانی یکی از اعضای این خانواده شناخته شده که در ترمیم زخم های اپیدرم پوستی ایفای نقش می کند. این فاکتور، یک پلی پپتید اساسی برای ترمیم زخم و آغاز تقسیم میتوزی است. در این مطالعه، ژن فاکتور رشد اپیدرم انسانی از بانک ژنی استخراج و پس از بهینه سازی کدون‌های آن براساس ترجیح کدونی باکتریE. coli در وکتور pET21a(+) سنتز گردید. وکتور حامل ژن مذکور به...

full text

بررسی پایداری زیرواحدهای نوترکیب و تغییریافته کالپروتکتین

زمینه و هدف: کالپروتکتین یک فاکتور دخیل در ایمنی ذاتی است و همراه با دو زیرواحد خود، S100A8 و S100A9 در فرآیندهای التهابی و تومورزایی شرکت می کند. این مطالعه به منظور بررسی پایداری دمایی زیرواحدهای طبیعی و تغییریافته کالپروتکتین نوترکیب در حضور لیگاند کلسیم انجام شد. مواد و روش ها: زیر واحدهای نوترکیب S100A8 و S100A9 در دو شکل طبیعی و تغییر یافته با DEP ، پس از انکوباسیون با کلسیم توسط دستگا...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 18  issue 4

pages  15- 20

publication date 2014-10

{@ msg @}

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023