بیان، استخراج، تخلیص و بررسی ایمنی‌زایی سه پروتئین نوترکیبLTB, THc, BoNT/A و مقایسه تیتر آنتی‌بادی تولید شده علیه آن‌ها در حیوان آزمایشگاهی

Authors

  • ابراهیمی, مرضیه
  • زمانیان عضدی, مونا
  • سعادتی, مجتبی
  • سلیمیان, جعفر
  • صدیقی مقدم, بیژن
  • عزیزی جلیلیان, فرید
  • نکویی فرد, حکمت
Abstract:

  سابقه و هدف: در میان عوامل باکتریایی، شایع‌ترین عامل بیماری اسهال، باکتری اشریشیا‌کلی انتروتوکسیژنیک است. تزریق زیرواحد LTB توکسین آن قادر به ایجاد مصونیت شش ماهه در میزبان است. توکسین تتانوس کلستریدیوم تتانی عامل بیماری مهلک کزاز است. به‌وسیله واکسن توکسوئید کزاز می‌توان از بیماری کزاز جلوگیری نمود. این مصونیت تا 10 سال در انسان ادامه می‌یابد. ناحیه اتصالی توکسین کزاز (THc) بخش اصلی در ایمنی‌زایی این توکسین محسوب می‌شود. کلستریدیوم بوتولینوم عامل بیماری بوتولیسم است. تزریق واکسن توکسوئید بوتولینوم نیز مصونیت 2 ساله علیه بیماری ایجاد می‌کند. هدف از این مطالعه، تولید و بررسی ایمنی‌زاییLTB, BONT/A و THc در حیوان می‌باشد. مواد و روش‌ها: از سه باکتری E.Coli Bl21 DE3 تراریخت شده با وکتور pET28a که به‌طور جداگانه حاوی سه ژن نوترکیب ltb, bont/a-Hc و thc بودند، جهت بیان پروتئین‌های نوترکیب فوق استفاده شد. هر سه پروتئین مورد نظر استخراج، تخلیص و بر روی ژل SDS-PAGE بررسی گردیدند. سپس ایمنی‌ز‌‌ایی موش‌های آزمایشگاهی به‌وسیله این سه پروتئین صورت گرفت. تیتر آنتی‌بادی حاصل از پروتئین‌های نوترکیب با استفاده از تست الایزا و آزمون آماری دو طرفه آنووا مورد ارزیابی و مقایسه قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج ارزیابی ژل SDS-PAGE بیان و تخلیص مناسب هر سه پروتئین را نشان داد. نتایج ایمنی‌زایی و تست‌های الایزای سرم این سه گروه ایمن شده نشان داد که تیتر آنتی‌بادی علیه پروتئین نوترکیب THc بالاتر از پروتئین‌های نوترکیب LTB و BONT/A است. هم‌چنین تفاوت معنی‌داری بین تیتر آنتی‌بادی LTB و BONT/A (0001/0P value<) مشاهده گردید.  نتیجه‌گیری: اختلاف در تیتر آنتی‌بادی این سه گروه ممکن است به طول عمر سلول‌های خاطره حاصله در این گروه‌ها ارتباط داشته باشد. هر چند که نتایج نیاز به مطالعات بیش‌تری دارد

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بیان، استخراج، تخلیص و بررسی ایمنی زایی سه پروتئین نوترکیبltb, thc, bont/a و مقایسه تیتر آنتی بادی تولید شده علیه آن ها در حیوان آزمایشگاهی

سابقه و هدف: در میان عوامل باکتریایی، شایع ترین عامل بیماری اسهال، باکتری اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک است. تزریق زیرواحد ltb توکسین آن قادر به ایجاد مصونیت شش ماهه در میزبان است. توکسین تتانوس کلستریدیوم تتانی عامل بیماری مهلک کزاز است. به وسیله واکسن توکسوئید کزاز می توان از بیماری کزاز جلوگیری نمود. این مصونیت تا 10 سال در انسان ادامه می یابد. ناحیه اتصالی توکسین کزاز (thc) بخش اصلی در ایمنی ز...

full text

مقایسه تیتر آنتی بادی تولید شده بر علیه پروتئین‌ های نوترکیب BLF1 و BLF1-STxB در رت‌ های آزمایشگاهی

باکتری بورخولدریا­سودومالئی عامل بیماری میلوئیدوزیس و باکتری شیگلا­دیسانتری شایع ­ترین عامل اسهال است و تاکنون هیچ واکسن موثری علیه این دو باکتری تولید نشده است. پروتئین BLF1 باکتری بورخولدریا سودومالئی نقش مهمی در ایجاد بیماری ­زایی و عفونت دارد. STxB شیگلا­دیسانتری یکی از فاکتورهای مهم در بیماری ­زایی است و هم چنین دارای نقش یاوری و حاملی است. ترکیب پروتئین BLF1 با STxB می ­تواند کاندیدای من...

full text

کلونینگ،بیان، تخلیص و بررسی فعالیت ضد استافیلوکوکی پروتئین لیزوستافین اولیه در شرایط آزمایشگاهی

  سابقه و هدف: استافیلوکوک اورئوس عامل طیف وسیعی از عفونت‌ها،از عفونت‌های پوستی تا انتشار آن وعفونت‌های سیستمیک منجر‌شونده به نارسایی ارگانی ومرگ می‌باشد.مقاومت دارویی در این گروه از پاتوژن‌ها یک نگرانی جهانی شده و نیازمند توسعه‌ی عوامل درمانی جدیداست. لیزوستافینیک نمونه از این عوامل می‌باشد،لیزوستافینیک باکتریوسین تولید‌شده به‌وسیله‌ی استافیلوکوک سیمولانس است که باعث کشتن سلول‌های استافیل...

full text

بررسی و مقایسه میزان ایمنی زایی پروتئین های نوترکیب زیر واحد اتصالی توکسین های کزاز و بوتولینیوم)تایپ (A

مقدمه: تنها واکسن موجود علیه تتانواسپاسمین(عامل اصلی بیماری کشنده کزاز) توکسوئید آن است که مصونیت 10 ساله ایجاد می کند. در حالی که توکسوئید بوتولینوم(عامل بیماری کشنده بوتولیسم) تنها مصونیت 2 ساله ایجاد مصونیت می نماید. این دو توکسین با 36 درصد همولوژی در یک خانواده قرار دارند اما خاطره ایمنی و میزان پاسخ ایمنی هومورال و احتمالاً میزان تولید آنتی ‌بادی علیه هر کدام متفاوت می باشد. هدف از مطالعه ...

full text

تولید و تخلیص آنتی‎بادی پلی‎کلونال علیه تتانوتوکسین

مقدمه: کزاز نوعی بیماری دستگاه اعصاب است که با افزایش صلابت و گرفتگی‌های عضلات مشخص می‌شود. عامل این بیماری کشنده، توکسین کلستریدیوم تتانی می‌باشد. تتانواسپاسمین شامل سه زنجیره L،‌ HN و HC می‌باشد. زنجیره HC بخش اتصال‌دهنده و ایمونوژنیک آن است و به عنوان کاندید واکسن مطرح می‌باشد. هدف از این مطالعه استفاده از ژن صناعی زنجیره HC تتانواسپاسمین و بررسی ایمنی‌زایی پروتئین نوترکیب حاصل از آن و نهایت...

full text

کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین SNAP-25

Background & Objectives:Clostridial neurotoxin inhibits neurotransmitter release by selective and specific intracellular proteolysis of synaptosomal associated protein of 25KDa (SNAP-25), synaptobrevin/VAMP-2 and syntaxin. SNAP-25 is one of the components that forms docking complex in synaptic ends. This protein is subtrate for botulinum neurotoxins types A,C, and E. Each of these toxin serotyp...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 16  issue 2

pages  246- 253

publication date 2015-01

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023