بررسی اثر انجماد شیشه ای بر میزان بیان نشانگرهای اختصاصی پرتوانی، Oct4 و Nanog، در بلاستوسیست های موش سوری

Authors

  • مجتبی دشتی زاد هیئت علمی پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، گروه زیست فناوری دام
Abstract:

مقدمه: از زمان اولین انجماد شیشه‌ای رویان موش در سال 1985، تلاش‌ها‌ی قابل توجهی برای توسعه و بهبود این تکنیک صورت گرفته است اما همچنان انجماد با اعمال آسیب‌های جدی بیوشیمیایی و کروموزومی بر روی رویان می‌تواند باعث تغییراتی در الگوی بیان ژن‌های دخیل در تکوین و عملکرد، کاهش لانه‌گزینی و نهایتا مرگ رویان گردد. هدف از این مطالعه بررسی تاثیرات انجماد شیشه‌ای بر زنده‌مانی و رشد و بررسی بیان ژن‌های تخصصی پرتوانی موثر در تکوین رویان از جمله ژن‌های Oct4 و Nanog در بلاستوسیست‌های منجمد- ذوب شده‌ی موش بود. روش کار: پس از تحریک تخمک‌گذاری موش‌های ماده و استحصال بلاستوسیست، فرآیند انجماد با حضور دی‌متیل سولفوکسید 15%، اتیلن‌گلیکول 15% و ساکارز 5/0 مولار به عنوان مواد سرما‌محافظ در محیط‌های انجمادی انجام شد و بلاستوسیست‌ها با قرار‌گیری روی Cryotop، به درون ازت مایع منتقل گشتند. فرآیند ذوب نیز با شست‌و‌شوی رویان‌ها در محیط ذوب حاوی ساکارز 1 مولار صورت پذیرفت. نهایتا میزان زنده‌مانی، خروج بلاستوسیست‌ها از زونا و نیز بیان ژن‌های Oct4 و Nanog به روش real time- PCR در بلاستوسیست‌های منجمد- ذوب شده و شاهد ارزیابی شد. نتایج: نرخ زنده‌مانی و خروج بلاستوسیست‌ها از زونا در تیمار انجماد نسبت به بلاستوسیست‌های منجمد نشده بطور معنی‌داری کاهش یافتند (81/5±43/94% در مقابل 100% برای زنده‌مانی و 76/11±78/57% در مقابل80/5± 88/86% برای خروج بلاستوسیست از زونا). همچنین بیان ژن‌های Nanog و Oct4 افزایش یافت. نتیجه‌گیری: با توجه به یافته‌های این آزمایش می‌توان گفت که انجماد شیشه‌ای بلاستوسیست موش سوری در مرحله‌ی بلاستوسیست می‌تواند باعث تغییر بیان ژن و کیفیت رویان گردد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بررسی بیان نشانگرهای‌ اختصاصی پرتوانی Oct4 و Nanog در بلاستوسیست‌های موش حاصل از لقاح آزمایشگاهی

 سابقه و هدف: اگرچه امروزه IVF به عنوان یک تکنیک پرکاربرد در درمان ناباروری می­باشد، اما مطابق مطالعات صورت گرفته، استرس ایجاد شده به واسطه­ی تغییرات اسمزی، اکسیژن، دما و pH در شرایط خارج از رحم می­تواند باعث تغییرات مورفولوژیکی، ژنتیکی و اپی­ژنتیکی در جنین­های برون­تنی نسبت به حالت درون­تنی ­گردد. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر IVF بر کیفیت جنین­ها از طریق ارزیابی نرخ زنده­مانی و رشد و هم­چنین...

full text

بررسی بیان نشانگرهای اختصاصی پرتوانی oct۴ و nanog در بلاستوسیست های موش حاصل از لقاح آزمایشگاهی

سابقه و هدف: اگرچه امروزه ivf به عنوان یک تکنیک پرکاربرد در درمان ناباروری می­باشد، اما مطابق مطالعات صورت گرفته، استرس ایجاد شده به واسطه­ی تغییرات اسمزی، اکسیژن، دما و ph در شرایط خارج از رحم می­تواند باعث تغییرات مورفولوژیکی، ژنتیکی و اپی­ژنتیکی در جنین­های برون­تنی نسبت به حالت درون­تنی ­گردد. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر ivf بر کیفیت جنین­ها از طریق ارزیابی نرخ زنده­مانی و رشد و هم­چنین ...

full text

اثرات انجماد شیشه ای بر میزان آپوپتوز در بلاستوسیست موش

مقدمه: در سال های اخیر، پیشرفت های زیادی در انجماد شیشه ای (vitrification) برای نگهداری جنین صورت گرفته است؛ ولی تاکنون، روش قابل اعتمادی در انجماد شیشه ای که بتواند میزان بالایی از زنده ماندن جنین را نشان دهد، ارائه نشده است. زیرا مکانیسم آسیب های جنین به دنبال انجماد شیشه ای به طور دقیق مشخص نشده است. مطالعه حاضر به منظور بررسی تاثیر انجماد شیشه ای بر روی میزان آپوپتوز در جنین در مرحله بلاستو...

full text

مطالعه بیان ژن‌های پرتوانی در مراحل مختلف تکوین جنینی ماهی گورخری (Danio rerio)

اگرچه نشانگرهای پرتوانی در پستانداران به خوبی شناخته شده‌‌اند، اما هنوز دانش ما در مورد این نشانگرها در ماهیان و دیگر آبزیان اندک است. در این راستا، بیان ژن‌های oct4، nanog، klf4، lin28، c-myc و sox2 که به عنوان هسته مرکزی پرتوانی در موجودات مختلف گزارش شده‌اند، در مراحل مختلف تکوین جنینی ماهی گورخری، شامل مراحل مورولا (71 درجه‌ساعت)، بلاستولای میانی (5/105 درجه‌ساعت)، گاسترولا (310 درجه‌ساعت) ...

full text

بررسی تاثیر سوراخ کردن مصنوعی بلاستوسیست موش بر زنده-مانی و میزان بیان ژن Wnt3a

امروزه جهت افزایش میزان لانه‌گزینی و حاملگی پس از انتقال رویان-های حاصل از لقاح آزمایشگاهی ، از تکنیک‌های مختلف هچینگ کمکی از جمله سوراخ کردن مصنوعی بلاستوسیست استفاده می‌شود. در این مطالعه با سوراخ کردن مصنوعی بلاستوسیست با استفاده از ریز سوزن‌های تزریق کننده، کیفیت بلاستوسیست‌های موش با بررسی نرخ زنده‌مانی، خروج بلاستوسیست از زونا و میزان بیان ژن Wnt3a مورد ارزیابی قرار گرفت. بلاستوسیست‌ها...

full text

بررسی اثر هیالورونان روی میزان لقاح اسپرم‌های موش سوری قبل از انجماد و پس از ذوب

Background: Freezing and thawing induce a number of insults to the sperm cells, such as low motility and low fertilization capability. For evaluation of hyaluronan (HA) supplementation on sperm characteristics, we investigated the effect of hyaluronan (HA) on mouse sperm before freezing and after thawing. Methods: For this purpose we removed cauda epididimes from 24 male mice with aseptic meth...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 28  issue 4

pages  568- 578

publication date 2016-02-20

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023